化工儀器網
詳細介紹
一、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規格 | 商品貨號 |
大鼠股動脈內皮細胞 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | A01X1541 |
二、細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
三、使用方法
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；
4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化；
3)經1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內；
4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
公司正在出售的產品：
大鼠睪丸支持細胞 | 人卵巢癌相關成纖維細胞永生化 |
3,3′,5-三碘代-L-甲狀腺原氨抗體 | 辣根過氧化物標記的RhoGAP92B抗體 |
人原代聽神經瘤細胞永生化 | 辣根過氧化物標記的MYOZ抗體 |
人原代髓核細胞永生化 | 辣根過氧化物標記的G蛋白偶聯受體3抗體 |
人原代神經鞘膜瘤細胞永生化 | 辣根過氧化物標記的蛋氨氨肽2抗體 |
人胰腺腫瘤成纖維細胞永生化 | 辣根過氧化物標記的抗重組人胰島抗體 |
人子宮內膜上皮細胞永生化 | 辣根過氧化物標記的死亡效應結構域蛋白2抗體 |
大鼠腦微血管內皮細胞永生化 | 辣根過氧化物標記的早老γ分泌抗體 |
小鼠肺成纖維細胞永生化 | 辣根過氧化物標記的宮頸癌抑制蛋白4抗體 |
小鼠胰腺星狀細胞永生化 | 辣根過氧化物標記的心臟鈣粘蛋白抗體 |
鴨腦微血管內皮細胞永生化 | 辣根過氧化物標記的40S核糖體蛋白S5抗體 |
湖羊瘤胃上皮細胞永生化 | 大鼠股動脈內皮細胞辣根過氧化物標記的多肽N-乙酰氨基半乳糖轉移11抗體 |
豬肝星狀細胞永生化 | 辣根過氧化物標記的腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體 |
豬鼻腔粘膜上皮細胞永生化 | 辣根過氧化物標記的蛋白激B抗體 |
人骨骼肌細胞永生化 | 辣根過氧化物標記的組織蛋白H迷你鏈抗體 |
化工儀器網