詳細介紹
操作規程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:生物素標記dUTP溶液(0.25mM)
英文名稱:Biotin-11-dUTP
產品規格:20μl
發貨周期:1~3天
TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒是用來檢測細胞在凋亡過程中細胞核DNA的斷裂情況, 其原理是生物素(Biotin)標記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以連接到凋亡細胞中斷裂DNA的3′-OH末端,并可與連接辣根過氧化酶的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)特異結合,在辣根過氧化酶底物二氨基聯(DAB)的存在下,產生很強的顏色反應(呈深棕色),特異準確地定位正在凋亡的細胞,因而在普通顯微鏡下即可觀察和計數凋亡細胞;由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3′-OH形成,很少能夠被染色。 |
試劑盒組份
組份
Cat:KFS433
儲存條件
Biotin-11-dUTP
20μl
-20℃,避光,12個月
儲存條件:-20℃避光,有效期12個月
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
酚酞(標準品)英文名稱: Levothyroxine Sodium 表面趨化因子受體4相關蛋白2抗體包裝1g
(標準品)英文名稱: Lidocaine肉堿棕櫚酰基轉移2抗體包裝5g
夫拉扎勃(標準品)英文名稱: Lidocaine肉堿氧位基轉移抗體包裝100g
夫西地(標準品)英文名稱: Lidocaine HClIV型膠原α3結合蛋白抗體包裝25g
夫西地鈉(標準品)英文名稱: Lidocaine HCl肉堿棕櫚?;D移1B抗體包裝5g
呋喃雜質A(標準品)英文名稱: Lisinopril Dihydrate膽固27α羥化抗體包裝25g
呋喃妥因(標準品)英文名稱: Lisinopril Dihydrate膽固24α7羥化抗體包裝5g
呋喃西林(標準品)英文名稱: Lobeline Hydrochloride色P450 4A1抗體包裝25g
呋喃唑酮(標準品)英文名稱: Lonidamine色P4504A22抗體(脂肪Ω羥化)包裝5g
呋塞米(標準品)英文名稱: Lopinavir周期蛋白依賴性激抑制劑2D抗體包裝1g
伏格列波糖(標準品)英文名稱: Lopinavir膽固24S-羥化包裝5g
伏格列波糖(標準品)英文名稱: Loratadine豬瘟病抗體包裝100g
伏立康唑(標準品)英文名稱: Loratadine色c氧化亞型2抗體包裝25g
伏立諾他(標準品)英文名稱: Melatonine周期G2抗體包裝5g
胞嘧啶/5-胞嘧啶(標準品)英文名稱: Melatonine銅藍蛋白抗體包裝1g
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格:HPLC>98%,標準品信號識別顆??贵w試劑盒偽原薯蕷皂苷;Pseudoprotodi
黃曲霉Aspergillus│flavus 質量規格:>99.0%,BR信號傳導子及轉錄激活子6試劑盒王不留行黃酮苷;Vaccarin
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規格:HPLC>98%,標準品信號傳導子及轉錄激活子5試劑盒烏藥環戊烯二酮;Methyllind
生物素標記dUTP溶液(0.25mM)鹽前黃
其他原黃鹽鹽
英文名稱:Proflavine hydrochloride
其他英文名稱:3,6-Diaminoacridine hydrochloride;Proflavine monohydrochloride
產品規格:試劑級
包裝:25克
CAS號:952-23-8
C13H11N3•HCl=245.71
級別:Reagent grade
含量:≥98.0%
性狀:暗橙色或橙綠色粉末或針狀結晶。熔點270℃
用途:生化研究。
保存:RT。保質期5年