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詳細介紹
參數規格：
產品名稱：刺激隱核蟲PCR檢測試劑盒
產品貨號：FS-02R6466
產品規格：48T
產品分類：水產養殖病害檢測系列（恒溫熒光法）
產品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Phospho-MYPT1 (Thr853) /FITC 熒光標記磷化肌球蛋白磷抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TRH/FITC 熒光標記促甲狀腺釋放抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABCE1 核糖核L抑制蛋白抗體 0.2ml
Mouse Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
phospho-GSK-3 Beta(Ser9) 磷化糖原合激-3β抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rab27a RAM-11抗體 0.2ml
TRH/FITC 熒光標記促甲狀腺釋放抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
CD4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit 人CD4分子Multi-class antibodies： 48T
CXCR3/CD183 細胞表面趨化因子受體3抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse human IgG(3D3)/Gold 膠體金標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.5ml
Human hypothetical protein LOC677340 ELISA Kit 人假定蛋白LOC677340 96T
RNF12 環指蛋白12抗體 0.2ml
ICAM1 細胞間粘附分子-1抗體 0.1ml
CXCR3/CD183 細胞表面趨化因子受體3抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit chicken IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗雞IgG 0.1ml
Glypican 5 磷脂酰基醇蛋白聚糖-5抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAM28 去整合樣金屬蛋白28抗體 0.2ml
MAPK4/FITC 熒光標記原活化蛋白激4抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗IgM 0.1ml
TFPI/LACI /FITC 熒光標記組織因子途徑抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
刺激隱核蟲PCR檢測試劑盒組（leucine）含量比色法檢測試劑盒20次大鼠活化蛋白Celisa檢測試劑盒
組（leucine）含量高效液相色譜法檢測試劑盒20次大鼠睫狀神經營養因子elisa檢測試劑盒
名稱大鼠己糖elisa檢測試劑盒
飲料糖精（saccharin）含量比色法檢測試劑盒20次大鼠溴脫氧核苷尿嘧啶elisa檢測試劑盒
糖果糖精（saccharin）含量比色法檢測試劑盒20次大鼠8羥基脫氧鳥苷elisa檢測試劑盒
食物糖精（saccharin）含量比色法檢測試劑盒20次大鼠白介3elisa檢測試劑盒
藥品糖精（saccharin）含量比色法檢測試劑盒20次大鼠白介1elisa檢測試劑盒
化妝品糖精（saccharin）含量比色法檢測試劑盒20次大鼠Ⅲ型前膠原肽elisa檢測試劑盒
咖啡糖精（saccharin）含量比色法檢測試劑盒20次大鼠載脂蛋白A1elisa檢測試劑盒
飲料糖精（saccharin）含量紫外光譜法檢測試劑盒20次大鼠環磷鳥苷elisa檢測試劑盒
糖果糖精（saccharin）含量紫外光譜法檢測試劑盒20次大鼠纖連蛋白elisa檢測試劑盒
食物糖精（saccharin）含量紫外光譜法檢測試劑盒20次大鼠β羥丁elisa檢測試劑盒
藥品糖精（saccharin）含量紫外光譜法檢測試劑盒20次大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽elisa檢測試劑盒
化妝品糖精（saccharin）含量紫外光譜法檢測試劑盒20次大鼠26S蛋白體elisa檢測試劑盒
咖啡糖精（saccharin）含量紫外光譜法檢測試劑盒20次大鼠骨成型蛋白4elisa檢測試劑盒
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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