詳細介紹
培養操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
250ml×3 | 1~3天 |
商品介紹:
瑞氏染液主要應用于血液和骨髓涂片染色。 |
操作步驟
1. (選做)平置血涂片于染色架上,滴加甲醇固定液,室溫固定15-30 分鐘。
2. 吸去固定液,室溫通風晾干。
3. 將試劑一滴加到載玻片上,均勻覆蓋住載片上血細胞,染色時間約為1 分鐘。等染液有變紅的趨勢時,迅速滴加兩倍試劑一的量的試劑二。繼續染色5 到8 分鐘。
4. 小股水流洗片,防止將大量的細胞從載片上沖落下來從而影響以后的觀察。30s 水洗結束后將載片放到陰涼處風干。
5. 顯微鏡鏡檢。
染色結果
1. 紅細胞呈淺紅色,中央稍淡而略有蝶形態。
2. 白細胞系統清晰易分,細胞膜清晰呈紫黑色,細胞核著色呈深淺不同的紫紅色,胞漿中各種顆粒區分明顯。其中中性粒細胞漿中顆粒呈淡紫紅色,嗜酸粒細胞漿中顆粒呈桔紅色、嗜堿性粒細胞胞漿中顆粒呈藍褐色。單核細胞的胞漿呈灰藍色,胞漿中顆粒呈細小淡紫紅色或藍紫色。淋巴細胞胞漿呈淡藍色。
注意事項
1. 推片:取全血3 微升左右置載玻片上,將推玻片保持與載玻片30 度角,置于血滴正前方,稍往后移與血滴接觸,即可見血液沿推片下緣散開,再勻速沿載玻片平面向前滑動,至血液鋪完血膜為止。
2. 涂片時不要太厚也不要太薄,太厚紅細胞重疊并易皺,太薄時不易找到白細胞。
3. 用蠟筆在血膜兩頭劃線,平放于染色架上。血膜要干透后才能染色,否則染色時血膜易脫落。
4. 試劑一及二染液不能過少,以防很快蒸發引起染液沉淀。試劑一不可少于400 微升,試劑二是試劑一的1 倍量。滴加試劑一及二時要輕搖玻片或用洗耳球對準血片吹氣,使染液充分混合。
5. 鏡檢時如果紅細胞偏藍,請放在蒸餾水中1-3 分鐘,直至紅潤為止。
6. 染色過淡,可復染。染色過深,可用水沖洗或浸泡,還可用75%乙醇脫色3-5 秒。
儲存:2~8℃,避光,有效期12個月。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
伊維菌(標準品)英文名稱: Aucubin微管相關蛋白EB家族3抗體包裝25g
依達拉奉(標準品)英文名稱: Metronidazole真核翻譯起始因子5抗體包裝5g
依法韋侖(標準品)英文名稱: Metronidazole遺傳性前列腺癌蛋白2抗體包裝25g
依那普利拉(標準品)英文名稱: 8-O-Acetylharpagide磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5g
依那普利雙(標準品)英文名稱: Chrysoobtusin磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝25ml
依諾肝鈉(標準品)英文名稱: Myristicin磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5ml
依諾沙星(標準品)英文名稱: Kakuol染色體區域穩定蛋白/核輸出蛋白1/染色體區域穩定必需蛋白抗體包裝100mg
依帕司他(標準品)英文名稱: L-Asarinin上皮微管相關蛋白7抗體包裝1g
依普利(標準品)英文名稱: Gitogenin堿性鞘磷脂7抗體包裝100g
依替膦二鈉(標準品)英文名稱: Isoliquiritigenin表皮生長因子樣重復折疊1結構域蛋白3抗體包裝25g
依替米星(標準品)英文名稱: Isoliquiritigenin長鏈脂肪延長長ELOVL6抗體包裝100g
*度(標準品)英文名稱: Ginsenoside Re酪蛋白激受體A6抗體包裝25g
*度(標準品)英文名稱: Ginsenoside F4酪蛋白激受體A3抗體包裝5g
*紅霉(標準品)英文名稱: Ginsenoside RK3酪蛋白激受體A7抗體包裝1g
*(標準品)英文名稱: Ginsenoside RH4酪蛋白激受體B1抗體包裝5g
腐皮鐮孢Fusarium│solani 質量規格:>95%,BR糖缺失性轉鐵蛋白試劑盒2,3,5,4’-四羥基二乙烯-2-O
: ATCC27562=DSM10143=NBRC15645=JCM3725=BCRC12905=CCRC12905=CECT529=CCUG13448資源名稱: 創傷弧菌 質量規格:HPLC>95%,標準品糖皮質激受體β試劑盒石吊蘭;Lysionotin
短芽孢桿菌Bacillus│pumilus 質量規格:>900μg//mg,USP,BR糖皮質激受體α試劑盒射干苷元;tectorigenin
快速瑞氏染液辛基瓊脂糖凝膠4FF
英文名稱:Octyl Sepharose 4FF
產品規格:國產
包裝:25毫升/100毫升
產品規格:進分
包裝:25毫升/100毫升
CAS號:68652-09-5
級別:BR
凝膠類型:疏水層析介質
粒 徑: 45-165µm
工作PH值:3-13
操作溫度:4-40℃
配基偶聯量:5µmol octyl/ml 介質
Matrix:Highly cross linked agarose 4%
Type of ligand:Octyl:R-O-CH2-CH(OH)-CH2-O-(CH2)7-CH3
Bead form:R igid,spherical,macro porous
Mean particle size:90um diameter
Particle size distribution:45~165um
Degree of substitution:approx 5 umol octy/ml medium
PH stability:working range 3-13 and cleaning range 2-14
Autoclavable:20 min at 121℃
Linear flow rate at 25℃:≥150cm/h at 100kPa(1 bar, 14.5 psi);XK50/60,25cm bed height
Chemical stability:Stable in all commonly used aqueous buffers-1mM HCL;1M NaOH;(40℃,7 days) 30% isopropanol;70% ethanol; 6 M guanidine-hydrochloride;30% acetonitrile
性狀:含20%乙,底部為乳白色膠體。
用途:生化研究。疏水性中等,適合各種蛋白的分離和純化
保存:2~8℃