詳細介紹
兔雪旺細胞
培養基:原代雪旺細胞培養體系
傳代特性:根據細胞特性
消化液:0.25%胰dan白酶
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:雪旺細胞沿神經元的突起分布,包裹在神經纖維上,雪旺細胞的外表面有基膜,能分泌神經營養因子,促進受損的神經元的存活及其軸突的再生,參與周圍神經系統中神經纖維的構成。研究表明,神經元延伸時對與其接觸的底物是非常具有選擇性的,而且一旦與雪旺細胞接觸,神經纖維的延伸就會嚴格限制在Bungner帶內。
一、細胞基本屬性
細胞名稱 | 兔雪旺細胞 | 商品貨號 | A01X2196 |
組織來源 | 正常腦組織 | 種屬來源 | 兔 |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細胞形態 | 長梭形,不規則細胞 |
原代細胞分離培養的思路:
取材--分離--培養--鑒定
首先將組織從機體中取出,經胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞,再在合適的培養基中培養,使細胞繁殖到一定系數后進行細胞鑒定。
實驗步驟:
一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中,將大鼠斷頭置于玻璃培養皿中,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養皿中,去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養皿中。
四、用細解剖鑷去除大腦白質、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質。
五、大腦皮質放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。
七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養液懸浮混勻,鋪于經離心形成連續梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。
加入DMEM培養液(20%FBS,4ug/ml素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養皿中,置于37℃、5%CO2培養箱內靜置培養24h后更換不含素的混合培養基,隨后隔天換液。
公司正在出售的產品:
小鼠棕色脂肪細胞 | 兔脂肪細胞 |
角膜上皮蛋白TGFBI重組兔單克隆抗體 | PE-Cy5標記的α2纖溶色上皮衍生因子抗體 |
兔表皮干細胞 | PE-Cy5標記的轉錄調節因子DEC2抗體 |
兔前脂肪細胞 | PE-Cy5標記的CD28抗體 |
兔脂肪微血管內皮細胞 | PE-Cy5標記的比伐盧定(水蛭類似物)抗體 |
兔真皮毛乳頭細胞 | PE-Cy5標記的細胞骨架相關蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B抗體 |
兔外根鞘細胞 | PE-Cy5標記的磷化T細胞轉錄因子NFAT4抗體 |
兔毛囊角質細胞 | PE-Cy5標記的磷化端粒逆轉錄抗體 |
兔骨髓間充質干細胞 | PE-Cy5標記的甲基化組蛋白H3 (tri methyl K36) 單克隆抗體 |
兔脂肪干細胞 | PE-Cy5標記的關節炎相關基因抗體 |
兔滑膜間充質干細胞 | PE-Cy5標記的碳水化合物磺基轉移8抗體 |
兔毛囊干細胞 | 兔雪旺細胞PE-Cy5標記的信號轉導和轉錄激活因子5抗體 |
兔膈肌細胞 | PE-Cy5標記的蛋白質磷2A亞基3抗體 |
兔肌腱成纖維細胞 | PE-Cy5標記的細胞色C氧化蛋白7C抗體 |
兔T淋巴細胞 | PE-Cy5標記的NHP2核糖核蛋白樣蛋白1抗體 |
注意事項:
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,yi酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。