人胰腺神經內分泌腫瘤細胞永生化公司正在出售的產品：魚鰓細胞系 RTgill-W1 (ATCC CRL-2523)人肝星形細胞帶紅色熒光LX-2+RFP(STR鑒定正確)人腎癌細胞A-498(STR鑒定正確)人神經內分泌前列腺癌細胞NCI-H660人胰腺癌細胞系SW 1990(STR鑒定正確)人小膠質細胞HMC3(STR鑒定正確)人正常卵巢上皮細胞 IOSE-80(STR鑒定正確)

細胞詳述

胰腺作為一個分泌器官，分泌的液體非常多，可分為外分泌器官與內分泌器官。其中內分泌器官得了腫瘤，統稱為神經內分泌腫瘤。相對于胰腺癌，其生存率則高的多，但胰腺神經內分泌腫瘤同樣位于腹膜后，位置較深，早期癥狀不明顯，與胰腺癌類似。

胰腺神經內分泌腫瘤是源于神經內分泌系統多能干細胞的一類異質性腫瘤，占胰腺腫瘤的3%-7%。   

該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。

注意事項：  收到細胞后第一次傳代建議1：2傳代，充液培養基是維持培養基，不能用來培養細胞。

細胞特性

1） 細胞來源于人手術胰腺神經內分泌腫瘤組織。

2） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

3） 細胞生長方式：鋪路石狀細胞，貼壁培養。

一、細胞基本屬性

二、細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片

三、使用方法

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化；

3)經1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內；

4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

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四、注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。