詳細介紹
操作規程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:細胞凋亡檢測試劑盒Ⅱ(AP)
英文名稱:
產品規格:20T
發貨周期:1~3天
保存條件:-20℃冰凍保存。
保存期:一年
工作原理: 在機體內部隨時都在發生著細胞的死亡。傳統上用顯微鏡來觀察細胞的死亡,其特征為核染色質的濃縮及碎片的形成。但是這種現象出現的很晚,時間也很短暫。凋亡的特征是內源性核酸內切酶被激活,細胞自身的染色質或DNA 被切割,出現單鏈或雙鏈缺口,并產生與DNA斷點數目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標記的dUTP(DIG-dUTP)標記至3’-OH 末端,DIG-dUTP 結合在DNA斷點部位,可以通過生物素化抗抗體(Anti-DIG-Biotin)和 SABC-AP反應后,加入顯色底物 BCIP/NBT予以顯示。凋亡的細胞核呈紫藍色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。 |
試劑盒內容:
1.標記緩沖液(Labeling Buffer)1ml
2.末端脫氧核糖核酸轉移酶(TdT,×20)20μl
3.DIG-dUTP(×20)20μl
4.封閉液(Blocking Reagent)4ml
5.生物素化抗抗體(×100)20μl
6..SABC-AP(×100)20μl
7.Proteinase K(×200)50μl
8.BCIP/NBT 顯色劑(×20)0.2ml
9.抗體稀釋液4ml
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
白細胞介24(IL24)elisa試劑盒英文名稱:IL24 ELISA Kit12號染色體開放閱讀框42抗體包裝100g
白細胞激活黏附因子(ALCAM)elisa試劑盒英文名稱:ALCAM ELISA Kit11號染色體開放閱讀框46抗體包裝25g
白細胞彈性蛋白抑制因子(LEI)elisa試劑盒英文名稱:LEI ELISA Kit11號染色體開放閱讀框67抗體包裝500g
白三烯A4解(LTA4H)elisa試劑盒英文名稱:LTA4H ELISA Kit11號染色體開放閱讀框77抗體包裝5g
白介9(IL9)elisa試劑盒英文名稱:IL9 ELISA Kit11號染色體開放閱讀框16抗體包裝25g
白介8受體β(IL8Rβ)elisa試劑盒英文名稱:IL8Rβ ELISA Kit11號染色體開放閱讀框21抗體包裝5g
白介8受體α(IL8Rα)elisa試劑盒英文名稱:IL8Rα ELISA Kit11號染色體開放閱讀框24抗體包裝1g
白介7(IL7)elisa試劑盒英文名稱:IL7 ELISA Kit11號染色體開放閱讀框53抗體包裝500mg
白介6受體(IL6R)elisa試劑盒英文名稱:IL6R ELISA Kit11號染色體開放閱讀框57抗體包裝1g
白介6(IL6)elisa試劑盒英文名稱:IL6 ELISA Kit11號染色體開放閱讀框65抗體包裝25g
白介5受體α(IL5Rα)elisa試劑盒英文名稱:IL5Rα ELISA Kit11號染色體開放閱讀框71抗體包裝5g
白介5(IL5)elisa試劑盒英文名稱:IL5 ELISA Kit11號染色體開放閱讀框74抗體包裝100g
白介4(IL4)elisa試劑盒英文名稱:IL4 ELISA Kit12號染色體開放閱讀框4抗體包裝25g
白介35(IL35)elisa試劑盒英文名稱:IL35 ELISA Kit12號染色體開放閱讀框24抗體包裝1g
白介34(IL34)elisa試劑盒英文名稱:IL34 ELISA Kit環核苷門控陽離子通道蛋白CNG-1β抗體包裝5g
白葉枯病菌Xanthomonas│oryzae pv. oryzae 質量規格:>99%吲哚試劑盒鹽去氫駱駝蓬堿;Harmine Hyd
藤黃微球菌Micrococcus│luteus 質量規格:>98%,BR音猬因子N端試劑盒異佛手柑內酯 ;Isobergapten
: 1197資源名稱: 福氏志賀氏菌 質量規格:HPLC≥98%,標準品音猬因子試劑盒右旋四氫巴馬汀 ; D-Tetrahyd
細胞凋亡檢測試劑盒Ⅱ(AP)乙胺鹽鹽
其他 乙基氯化銨;鹽一乙胺;一乙胺鹽鹽;鹽乙胺;氯化乙基
英文名稱: Ethylamine hydrochloride
其他英文名稱: Ethylammonium chloride
產品規格: CP,98%
包裝:100克/500克
CAS號:557-66-4
C2H7N•HC1=81.54
級別:CP
含量:≥98.0%
干燥失重:≤2.0%
硫鹽:≤0.2%
水溶解試驗:合格
灼燒殘渣:≤0.5%
性狀:結晶。有吸濕性。溶于0.4份水,易溶于乙,微溶于和酮。相對密度 1.22。熔點 110℃。有刺激性
用途:生化研究。有機合成
保存:RT