豚鼠白三烯B4(LTB4)酶聯免疫試劑盒ELISA的操作要點?
優質的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條
件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內醫學檢驗一般均用板式點。
本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試
劑均與特殊儀器配合應用，兩者均有詳細的使用說明，嚴格遵照規定操作，必能得出
準確的結果。

豚鼠白三烯B4(LTB4)酶聯免疫試劑盒⑴標本的采取和保存
可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物
（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。
血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假
陽性反應。保存血清自采集時就應注意無菌操作，也可加入適當防腐劑。
⑵ 試劑的準備
按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包
括用于洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出
的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰
箱保存。
⑶加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物
加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。
⑷保溫
保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴。為避免蒸發，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時可讓反應板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA板應放在濕盒內。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。為保證這一點，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板同時測定。
⑸洗滌
可分為浸泡式和流水沖洗式兩種洗滌方式。
⑹顯色和比色
?顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應，此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應
的溫度和時間仍是影響顯色的因素。
?比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入酶標比色儀的比
色架中。以軟板為載體的試驗，需先將板置于標準96孔的座架中，才可進行比色。
?酶標比色儀
簡稱酶標儀，通常指于測讀ELISA結果吸光度的光度計。針對固相載體形式的不同，各有特制的適用于板、珠和小試管的設計。
⑺結果判斷
①定性測定
a．間接法和夾心法
陽性判定值；標本/陰性對照比值。
b. 競爭法
陽性判定值法；抑制率法。
②定量測定

2,6-二氯甲苯 進口/國產 CAS: 118-69-4

2-甲基-3-羥基-4-吡喃酮 進口/國產 CAS: 118-71-8

2,6-二甲基巰基苯酚 進口/國產 CAS: 118-72-9

3-苯基-L-脯氨酸 進口/國產 CAS: 118758-48-8

5-氯-2-硝基三氟甲苯 進口/國產 CAS: 118-83-2

2-氯苯甲酸 進口/國產 CAS: 118-91-2

4-氯-3,5-二硝基苯甲酸 進口/國產 CAS: 118-97-8

二異丁基氫化鋁 進口/國產 CAS: 1191-15-7

DDTT 進口/國產 CAS: 1192027-04-5

二氯-1,2-二硫環戊烯酮 進口/國產 CAS: 1192-52-5

N-甲基-2-吡咯甲醛 進口/國產 CAS: 1192-58-1

3-甲基-2-環己烯-1-酮 進口/國產 CAS:

鹽酸達波西汀 進口/國產 CAS: 119356-77-3

2-吡咯甲酸甲酯 進口/國產 CAS: 1193-62-0

3-奎寧環酮鹽酸鹽 進口/國產 CAS: 1193-65-3

3-[5-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-3-基]硫]-6-(1-羥乙基)-4-甲基-7-氧代-1-氮雜二環[3.2.0]庚-2-烯-2-甲酸 進口/國產 CAS: 119478-56-7

2-羥基喹喔啉 進口/國產 CAS: 1196-57-2

5-吲哚甲醛 進口/國產 CAS: 1196-69-6

氨甲環酸 進口/國產 CAS: 1197-18-8

CIN-1瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于分離小腸結腸炎耶爾森氏菌

CIN-1 Agar

改良Skirrow氏瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于彎曲桿菌的分離培養

Modified Skirrow Agar

甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計數

Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base

BCYE-CYS瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于軍團菌的選擇性分離培養

BCYE-CYS Agar

改良CCDA瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于彎曲桿菌分離培養

Modified CCDA Agar

Amies運送培養基管 20支/包 用于致病菌標本的運送保存

Amies Transport Medium

Stuart運送培養基管 20支/包 用于致病菌標本的運送保存

Stuart Transport Medium

Cary-Blair氏運送培養基管 20支/包 用于運送腸道致病菌標本

Cary-Blair Transport Medium

豚鼠白三烯B4(LTB4)酶聯免疫試劑盒無菌病毒運輸液(VTM) 3ml/支*36 用于甲流病毒標本運送

VTM Broth

基因工程大腸桿菌培養基