詳細介紹
產品名稱:人少突膠質前體細胞鑒定試劑盒
規格:6次/盒
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-IKK beta /FITC 熒光素標記核因子κB激酶beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-Phospho-Rb (Ser608) /FITC 熒光素標記磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh APRIN/PDS5B 雄激素誘導增殖抑制蛋白抗體 規格 0.2ml
Rabbit anti-MG IgG/FITC FITC標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.3ml
GPSM2 英文名稱: G蛋白信號調節蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Mink IgG 兔抗水貂IgG 規格 1mg
Anti-Phospho-Rb (Ser608) /FITC 熒光素標記磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
MAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A) 微管相關蛋白1A抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-Brs3/Bombesin Receptor 3 蛙皮素受體3抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PEA3 瘤促活化因子3抗體 規格 0.2ml
CD34 1:200 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Trop-2 英文名稱: 原肌球蛋白抗體 0.1ml
CKLF 英文名稱: 趨化素樣蛋白抗體 0.2ml
Anti-Brs3/Bombesin Receptor 3 蛙皮素受體3抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgM 兔抗大鼠IgM 1mg
Fibulin 5 英文名稱: 衰老關鍵蛋白抗體 0.2ml
熱休克蛋白-27抗體 Anti-HSP-27 0.1ml
Anti-PLGF/FITC 熒光素標記胎盤生長因子抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Rb/p105-Rb(Ser780) 磷酸化成視網膜細胞瘤抑癌蛋白抗體 規格 0.1ml
Anthrax 炭疽沉淀素血清(馬來源)Multi-class antibodies規格: 1ml
ATEXPA10 peptide 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥)抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
抗磷酸化Bcl-xL(pSer62)蛋白抗體 Anti-phospho-Bcl-xL 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Ser1166) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規格 0.1ml
人少突膠質前體細胞鑒定試劑盒DMEM高糖 10×1L Gibco
ZNF740 英文名稱: 鋅指蛋白740抗體 0.2ml
DYRK3 英文名稱: 雙特異性酪酸磷酸化調節激酶3抗體 0.2ml
抗磷酸化Bcl-xL(pSer62)蛋白抗體 Anti-phospho-Bcl-xL 0.1ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。