詳細介紹
小鼠淋巴結血管上皮細胞;F-2B價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 小鼠淋巴結血管上皮細胞;F-2B價格
形態特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性
培養條件
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 B類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Stanniocalcin 1/FITC 熒光素標記斯鈣素抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgG 羊抗小鼠IgG (免疫親和層析純化)Multi-class antibodies規格: 1mg
鼠抗人促卵泡生成素單克隆抗體 Anti-FSH 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的羊抗兔IgG 0.1ml
FMN1 英文名稱: 肢體畸形相關蛋白FMN1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-STAT1 (Tyr701) 磷酸化信號轉導與轉錄激活因子1抗體 規格 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgG 羊抗小鼠IgG (免疫親和層析純化)Multi-class antibodies規格: 1mg
Plant Vitamin B6,VB6 ELISA Kit 植物維生素B6Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-DNA-PKcs/FITC 熒光素標記DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CYBR1 細胞色素B還原酶1抗體 規格 0.2ml
Penicillin G/BSA 青霉素G偶聯血清白蛋白 2mg
KLK3 英文名稱: 激肽釋放酶3/舒血管素3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh WIG-1/PAG608 野生型P53誘導基因1抗體 規格 0.1ml
Anti-DNA-PKcs/FITC 熒光素標記DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Substance P 英文名稱: P物質抗體 0.1ml
EIF5 英文名稱: 真核翻譯起始因子5抗體 0.2ml
CD38抗體(人) Anti-CD38 0.1ml
Anti-VEGF-B/FITC 熒光素標記血管內皮生長因子B抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Gria2 (Ser880) 磷酸化谷氨酸受體2抗體 規格 0.1ml
CD82/KAI1 peptide 轉移抑制蛋白1抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
TGF Beta2(Mouse transforming growth factor Beta2) ELISA Kit 小鼠轉化生長因子β2Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-cath-K/CK /FITC 熒光素標記組織蛋白酶K抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EIF2AK2/PKR 蛋白激酶R抗體 規格 0.1ml
Bombyx mori Livetin,LT ELISA Kit 家蠶卵黃蛋白 96T
MAP7D1 英文名稱: 精酸/脯酸富含卷曲蛋白1抗體 0.2ml
ASB3 英文名稱: 錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體 0.2ml
Anti-cath-K/CK /FITC 熒光素標記組織蛋白酶K抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml