詳細介紹
小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY價格
形態特性 淋巴母細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細胞來自骨髓瘤細胞系 NS-1;由于次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HPRT、HGPRT)和腺嘌呤磷酸核糖轉移酶(APRT)缺陷導致該細胞對腺苷和鳥嘌呤的類似物抵抗。在氨基蝶呤、腺嘌呤和胸腺嘧啶存在的條件下,當該細胞作為永生化細胞與Rb(8.12)易位的雌性小鼠的B細胞融合時,會產生Ig重鏈基因位點的陽性選擇;Ig重鏈基因的選擇可使雜交瘤細胞更穩定地合成抗體。該細胞鼠痘病毒陰性。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-PKC gamma/SCA14/FITC 熒光素標記蛋白激酶C亞型G抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
human IgG (親和純化) 人IgGMulti-class antibodies規格: 10mg
人類皰疹病毒8抗體 Anti-HHV8/ORF K2/vIL-6 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgM 兔抗猴IgM 1mg
FAM76A 英文名稱: FAM76A蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ROCK2(Thr249) 磷酸化Rho相關蛋白激酶2抗體 規格 0.1ml
human IgG (親和純化) 人IgGMulti-class antibodies規格: 10mg
SAA3(Human serum amyloid A3) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白A3Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-MK2/MAPKK2 原活化蛋白激酶激酶2抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KCNC3/Kv3.3 離子通道蛋白Kv3.3抗體 規格 0.2ml
CORT ELISA Kit 大鼠皮質酮/腎上腺酮 96T
PHEX 英文名稱: 維生素D低磷性佝僂病蛋白 0.2ml
CAPD2 英文名稱: 染色體相關蛋白2抗體 0.2ml
Anti-MK2/MAPKK2 原活化蛋白激酶激酶2抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
TmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2) 膠質細胞系源性神經營養因子(多肽) 0.5mg
HLC3 英文名稱: 肺癌癌基因蛋白3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh C1orf51 1號染色體開放閱讀框51抗體 規格 0.2ml
Anti-Phospho-EphA2 (Tyr594) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化酪氨酸蛋白激酶A2受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh RSRC2 食道癌抑制生長蛋白抗體 規格 0.2ml
Anti-Phospho-MSK1 (Ser360)/FITC 熒光素標記磷酸化有絲分裂原和應激活化型蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
EPO 小鼠促紅細胞生成素Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-FGFR3/CD333 成纖維細胞生長因子受體3抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy3 Cy3標記的小鼠抗兔IgM 規格 0.1ml
ATF-1(Human activating transcription factor-1) ELISA Kit 人轉錄因子抗體-1 96T
STK33 英文名稱: 絲酸/蘇酸激酶33抗體 0.2ml
CDC37L1 英文名稱: 細胞分裂周期37樣蛋白1抗體 0.2ml
Anti-FGFR3/CD333 成纖維細胞生長因子受體3抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml