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產品名稱：INS-1(大鼠胰島細胞瘤細胞)

規格：5×106cells

貨號：YS-02X9874

產品分類:細胞系

儲存條件2℃-8℃，避光儲存

運輸條件冰袋冷藏運輸

注意事項

1、使用產品時應注意無菌操作，避免污染。

2、本產品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。

3、為保持本產品的最佳使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環境中。

4、所有產品請于保質期內使用，超出保質期，必須放棄使用。

5、本產品只供進一步科研使用，不可應用于臨床等其他方面。

 

實驗材料：

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶

2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞

3、50ml離心筒2個

4、滅菌培養皿1個，細胞培養瓶1個

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個

6、細胞計數板1塊；

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；

8、酒精燈1臺；

細胞復蘇步驟：

1：水浴鍋預熱至37℃備用

2：準備15mL離心管，并向其中加入適量培養基待用

3：將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋

4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內融化

5：用紙巾擦拭水漬，轉移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管

6：1200rpm離心3分鐘

7：棄上清，用新鮮培養基重懸細胞，接種至新的無菌培養器皿中

RABX5/Rabex5  G相關RABX5抗體 規格: 0.2ml

PERK  激樣內質網激抗體 規格: 0.2mlG3BP1  Ras GTP活化結合1抗體 規格: 0.1ml

Torc2/Crtc2  CREB轉錄共激活因子TORC2抗體 規格: 0.1ml

SIAH2  泛連接Siah2 規格: 0.1ml

SOAT2/ACAT2  酰基轉移2抗體 0.2ml

FAM40A  FAM家族40A抗體 規格: 0.2ml

CRCT1  富含半C端1抗體 規格: 0.2mlphospho-ATF2(Ser94)  磷化活化復制因子2抗體 規格: 0.1ml

phospho-IKK beta(Ser471)  磷化KB抑制激β抗體 規格: 0.1ml

RNF36  環指36抗體 規格: 0.2ml

COL6A5/Collagen VI alpha 5  6型膠原α5抗體 規格: 0.2ml

ZDHHC21  γ-氨基丁A受體相關膜3 規格: 0.2ml

INS-1(大鼠胰島細胞瘤細胞)華法林鈉 規格： 100mg

26146-27-0 ;lindenel 規格： 10mg

3-去氫松苓 規格： 5mg

紅花-I 規格： 20mg

23103-98-2;純品型;標準品;有證書 規格： 0.25g

491-70-3木犀草 規格： 20mg

83881-52-1利嗪 規格： 100mg

知母皂Ａ１ 規格： HPLC≥98%;20mg

506-26-3亞;Gamma lilenic 規格： 20mg

4261-42-1異葒草; Homoorientin 規格： 20mg

細胞培養方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。