詳細介紹
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務!
產(chǎn)品名稱:Ⅱ型前膠原羧基端肽免費代測試劑盒說明
英文名稱:C.Terminal Propeptide of type Ⅱ Collagen
檢測范圍:6.25ng/ml~200ng/ml
貨號:YS-E989421
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本
48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標準品 | 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標準品 | 150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標準品 | 150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標準品 | 150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標準品 | 150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
實驗注意事項:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。
2、自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期:6個月。
SF126(腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤)正辛酰胺(>98.0%(GC)(N))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N)n-Oct*
CL-0076EAC(小鼠艾氏腹水癌細胞)5×106cells/瓶×2硬脂酰胺(>90.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)Stearamide
GHR Others Rat 大鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 細胞裂解液 (陽性對照) 丁基鄰苯二甲酰羥乙酸丁酯(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)Butyl Phthalyl Butyl Glycolate
EpiFectagen? 上皮細胞轉(zhuǎn)染試劑盒間苯二酸雙(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Bis(2-ethylhexyl) Isophthalate
HO-8910PM細胞,高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞 小鼠肉瘤細胞,S37細胞 腎實質(zhì)細胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)熒光素質(zhì)量規(guī)格:ARFluorescein
前列腺癌細胞;PC-3 [PC3]wo7iumD-pantothenate右旋泛酸鈉100克CP,97.5%
PDE1C Others Human PDE1C 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 二硫化鉬 Molybdenum disulfide,99% 1317-33-5 100G 通用試劑
海馬神經(jīng)元G,D,X-401 GDX-401
RLFs, 大鼠肺成纖維細胞 R1000細胞 WISH(羊膜細胞)D-白酸,英文名或英文縮寫:D-Leucine,級別:BR,99%,規(guī)格:5克
結(jié)直腸腺癌細胞;LoVo16872-11-0四扶硼酸Fluoroboric acid
MET Others Human c-MET / HGFR (aa 956-1390) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) EDTA四鈉鹽,英文名或英文縮寫:EDTA tetrawo7ium salt,級別:BR,98%,規(guī)格:10克
CL-0364HuT 78(T細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2四甘醇 Bis[2-(2-xy7noxyqthoxy)qthyl] qtqr 11-60-7
HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系 絨癌細胞VP16耐藥株TNFa轉(zhuǎn)染,JEG-3/VP16-TNFa細胞 7F2(小鼠雜交瘤細胞)本亞磺酸鈉,英文名或英文縮寫:Benzenesulfinic acid wo7ium salt,級別:高,99%,規(guī)格:500ul*100支
肺癌細胞;A-427 [A427]二乙酰基,英文名或英文縮寫:2,4-Pentanedione,級別:BR,規(guī)格:2克
CD7 Others Mouse 小鼠 CD7 細胞裂解液 (陽性對照) PEG400 200g Sigma分裝
Ⅱ型前膠原羧基端肽免費代測試劑盒說明SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1全氟辛酸(分析標準品, 用于環(huán)境分析)Pentadecafluorooctanoic acid質(zhì)量規(guī)格:分析標準品, 用于環(huán)境分析
IFNA5 Others Human IFNαG / IFNaG / Ierferon alpha-G 細胞裂解液 (陽性對照) 正辛酸(分析標準品,≥99.9%(GC))n-Octanoic acid質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.9%(GC)
豚鼠皮膚細胞;GP-S2蓖麻油酸(分析標準品,99%)Ricinoleic acid質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99%
IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 細胞裂解液 (陽性對照) 硬脂酸(分析標準品,≥99.5%(GC))Stearic acid質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)
CL-0093HCC1937(癌細胞)5×106cells/瓶×2甜蜜素(標準品) Cyclamate質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。