詳細介紹
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱:血小板衍化生長因子B免費代測試劑盒說明
英文名稱:Platelet-Derived Growth Factor-B
檢測范圍:62.5pg/mL~2000pg/mL
貨號:YS-E988272
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質期:6個月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。
選型:
產品規格:96T/48T
96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本
48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標準品 | 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標準品 | 150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標準品 | 150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標準品 | 150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標準品 | 150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
實驗注意事項:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此過程數次。
2、自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關聯的,不能混用其他商的產品。只有嚴格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結果。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。
5、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。
7、所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期:6個月。
小鼠色素瘤細胞;B16鄰紅,英文名或英文縮寫:Cresol Red,級別:高,規格:25克
HEp-2細胞,喉表皮樣癌細胞 食管鱗癌,KYSE70細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1(二基安基基)二茂絡鐵 (DIMqTHYLcMINO)TRIMqTHYLTIN 993-20-0
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3隱色孔雀綠 LqUCOMcLcCHITq GRqqN 19-73-7
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) GLYCINE甘酸蛋白組學級1KG56-40-6RT
晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)109384-19-2N-Boc-4-羥基派啶N-BOC-4-xy7noxypipeni7ine
HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) APT瓊脂500毫升
胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]CBZ-L-異亮酸 Z-L-Isoleucine,98% 3160-59-6 5G 通用試劑
倉鼠腎細胞;HL-1 骨髓瘤細胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細胞 3T3/Fas/com細胞,轉基因細胞皇嘌呤;皇減;6-氧嘌呤;6-羌基嘌呤 Hypoxcnthinq;Purinq-6 (1H)-onq 68-94-0
胚腎細胞;293 [HEK-293]CupferronN-亞硝基本基羥胺鹽25克CP
ACPL2 Others Human ACPL2 細胞裂解液 (陽性對照) 7695-91-2酚乙酸酯DL-ALPHA-TOCOPHEROL ACETATE PH EUR
小鼠成纖維細胞;φ2柚皮素(標準品)Naringenin質量規格:HPLC≥98.0%,標準品
CTSV Others Human Cathepsin V / Cathepsin L2 細胞裂解液 (陽性對照) 柚皮素Naringenin質量規格:HPLC>97%
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1藥根堿(標準品)Jatrorrhizine質量規格:HPLC>98.0%,標準品
ULBP2 Others Human ULBP2 / N2DL-2 細胞裂解液 (陽性對照) 槲皮素 Quercetin dihydrate質量規格:HPLC>85%,二水BR
Ke-3 腎癌細胞槲皮素(標準品)Quercetin質量規格:HPLC>98.0%,標準品
血小板衍化生長因子B免費代測試劑盒說明CXCL16 Protein Rat 重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標簽)代森鋅Zineb質量規格:>90%
PC-3(前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FGFR3 細胞裂解液 (陽性對照) 雷公藤堿(標準品)Wilforine質量規格:HPLC≥98%,標準品
結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]新藤黃酸(標準品)Neogambogic acid質量規格:HPLC≥98%,標準品
19. 干細胞系統延齡草苷(標準品)Diosgenin glucoside質量規格:HPLC≥98%,標準品
CM-R040大鼠肝竇內皮細胞*培養基100mLN-反式-對香豆酰酪胺(標準品)N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine質量規格:HPLC≥98%,標準品
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產生可供觀察的顯色反應現象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。