詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 |
| 規格 | 100管/48樣 |
檢測方法 | 微量法 | 貨號 | GOY-SH109 |
產品分類 | 氧化磷酸化系列 | 用途 | 僅供科研實驗 |
測定意義:
ATP 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細胞能量代謝狀態的主要參數。測定 ATP 含量并且計算能荷,能夠反映能量代謝狀態。
測定原理:
肌酸激酶催化肌酸和 ATP 反應生成磷酸肌酸,可在 700nm 下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量,以此反應 ATP 含量。
自備儀器和用品:
酶標儀、水浴鍋、可調式移液槍、96 孔板、研缽和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 2.5mL 蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存;
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 1.2mL 蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑四:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑五:液體 25mL×1 瓶,4℃保存;
標準液:液體 10mL×1 瓶,0.5μmol/mLATP 標準液,4℃保存;
組織樣本的前處理:
1、組織中 ATP 的提?。悍Q取約 0.1g 樣本,加入 1mL 蒸餾水,冰浴勻漿,100℃加熱提取 5min, 8000g 4℃ 離心 15min,取上清液待測。
2、細胞或細菌中 ATP 的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數 量(10 4個):蒸餾水(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 蒸餾 水),超聲波破碎 1min(冰浴,強度 20%或 200W,超聲 2s,停 1s),8000g 4 ℃離心 15min; 取上清液待測。
3、血清(漿)中 ATP 的提?。喝〖s 0.1mL 血清(漿),加入 1mL 蒸餾水,冰浴勻漿,100℃ 加熱提取 5min,8000g 4℃ 離心 15min,取上清液待測。
測定步驟:
1、酶標儀或分光光度計預熱 30 min 以上,調節波長到 700nm,蒸餾水調零。
2、顯色劑的配制:臨用前請根據擬用顯色劑體積(樣本數×0.2 m L),按試劑四(mL):試劑五(mL)=1:5 的比例配制。用多少配多少。
3、樣本測定:
試劑名稱(μL) 測定管 標準管 空白管
樣本 10
標準液 10 10
試劑一 20 20
試劑二 10 10 10
試劑三 10 10
蒸餾水 30
充分混勻,37℃準確水浴 30min
顯色劑 200 200 200
37℃水浴 20min 后,700nm 下測定各管吸光值
注意:空白管和標準管通常只需要各做一個。
ATP 含量計算:
1、血清(漿)中 ATP 含量計算
ATP 含 量 (μmol/mL)=[C 標 準 管 ×(A 測 定 管 - A 空 白 管 )÷(A 標 準 管 - A 空 白 管 ) ×V1]÷(V3×V1÷V2)=5×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)
2、組織、細菌或細胞中 ATP 含量計算
(1)按蛋白濃度計算
ATP 含 量 (μmol/mg prot)=[C 標 準管 ×(A 測 定管 -A 空 白管 )÷(A 標 準管 -A 空 白管 ) ×V1]÷(V1÷Cpr)=0.5×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)÷Cpr蛋白質含量需要另外測定。 (2)按樣本鮮重計算
ATP 含 量(μmol/g 鮮 重)=[C 標 準 管 ×(A 測 定 管 -A 空 白 管)÷(A 標 準 管 - A 空 白 管) ×V1]÷(W×V1÷V2)=0.5×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)÷W
(3)按細菌或細胞密度計算
ATP 含量(μmol/10
4 cell)=[C 標準管×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) ×V1]÷(500×V1÷V2)=0.001×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)C 標準管:標準液濃度,0.5μmol/mL;V1:加入反應體系中樣本體積,0.01mL;V2:加入提取液體積,1mL;V3:加入血清(漿)體積:0.1mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL; W:樣本質量,g;500:細胞或細菌總數,500 萬。
注意:低檢測限為 10nmol/mL 或 10nmol/g 鮮重或 0.1nmol/mgprot
生化檢測試劑盒實驗操作說明:
一、抗氧化系列生化檢測試劑盒
包括氧化酶(XO)活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測、總抗氧化能力(TAC)檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測、植物類黃酮含量檢測、植物總酚(TP)含量檢測試劑盒。
氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,提供了一種簡單易用的比色分析法,用于測定各種樣品中的XO活性,特點是測定血清,血漿,組織/細胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,以及廣泛的檢測范圍:15.6 -500 mU/mL。
二、氧化系列生化檢測試劑盒
包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過氧化氫(H2O2)檢測、脂質過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒。
蛋白質羰基含量檢測試劑盒(比色法)為例,提供了一種簡單易用的比色法,用于分析不同生物樣品(細胞/組織裂解液,生物液體)中蛋白質羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。
特點是:1.測定組織樣本、細胞、細菌、血清等中的蛋白質羰基含量。2.樣本處理、實驗步驟以及結果計算更加詳盡準確精煉。3.保質期長。
三、抗逆系列生化檢測試劑盒
包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。
超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例,提供一種簡單易用的比色測定法,用于定量測定血清,血漿,組織/細胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。
特點是:1.測定血清,血漿,組織/細胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍:3.13- 200U/mL。
公司正在出售的產品:
游離脂肪酸含量(FFA)測試盒測植物組織 | 可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒 |
甲基檸檬酸合酶(MCS)測試盒 | 可溶性酸性轉化酶(SAI)測試盒 |
抗壞血酸氧化酶(AAO)測試盒 | 賴氨酸(LYS)測試盒 |
考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒 | 類黃酮糖基轉移酶(UFGT)測試盒 |
甲醛脫氫酶(FDH)測試盒 | 磷酸丙糖異構酶(TPI)測試盒 |
堿性蛋白酶測試盒 | 抗狼瘡抗凝抗體檢測試劑盒 IgG ELISA Kit |
堿性磷酸酶(AKP/ALP)測試盒 | 人αL巖藻糖苷ELISA試劑盒 |
堿性木聚糖酶測試盒/堿性半纖維素酶測試盒 | 人αELISA試劑盒 |
甲基檸檬酸合酶(MCS)測試盒 | 人α干擾素ELISA試劑盒 |
甲醛脫氫酶(FDH)測試盒 | 人αS轉移ELISA試劑盒 |
堿性蛋白酶測試盒 | 人α葡萄糖苷ELISA試劑盒 |
堿性磷酸酶(AKP/ALP)測試盒 | 人α酮戊二SUAN脫氫ELISA試劑盒 |
堿性木聚糖酶測試盒/堿性半纖維素酶測試盒 | ATP含量測試盒微量法人α突觸核蛋白ELISA試劑盒 |
結合態淀粉合成酶(GBSS)測試盒 | 人β2糖蛋白ELISA試劑盒 |
抗壞血酸過氧化物酶(APX)測試盒 | 人β2微球蛋白ELISA試劑盒 |