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人小細胞肺癌細胞;NCI-H446*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人小細胞肺癌細胞;NCI-H446*現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁/懸浮生長,混合
特征特性 該細胞是1982年由Carney D和Gazdar AF等從一位小細胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細胞的原始形態并不具有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態學上的變種,表達神經元*的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶;左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。與正常細胞相比,該細胞c-myc DNA序列擴增約20倍,RNA增加15倍。zui初傳代培養基用含有5%FBS的RPMI1640,另外添加10 nM氫的松、0.005 mg/ml胰島素、0.01 mg/ml轉鐵
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(87+5)
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 B類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
注意:*次植入后,在6-16小時內更換培養基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數據,用于證明細胞的真實性,并且幫助客戶更多的了解細胞特性。
組織人類巨細胞病毒蛋白酶(HCMV PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格: 20次
血液人類巨細胞病毒蛋白酶(HCMV PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格: 20次
體液人類巨細胞病毒蛋白酶(HCMV PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格: 20次
細胞3C類蛋白酶(SARS -CoV 3C-like PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格: 20次
組織3C類蛋白酶(SARS -CoV 3C-like PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格: 20次
細胞艾滋病毒1蛋白酶(HIV-1 PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格: 20次
組織艾滋病毒1蛋白酶(HIV-1 PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格: 20次
細胞切割酶/β分泌酶(MENAPSIN 2;β-SECRETASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格: 20次
組織切割酶/β分泌酶(MENAPSIN 2;β-SECRETASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格: 20次
細胞蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格: 20次
1S,2S)-N,N'-Dimethyl-1,2-cyclohexanediamine(1S,2S)-(+)-N,N'-二基-1,2-環己87583-89-9
Stannous methanesulfonate基磺酸錫53408-94-9
Sodium 1-naphthalenesulfonate1-萘磺酸130-14-3
23-0500-2NAC( 抗氧化劑 )2g
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )50L
醛縮酶100mg
冷啟動核酸酶10,000U
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