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人急性早幼粒白血病細胞;HL-6品牌
  • 人急性早幼粒白血病細胞;HL-6品牌
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貨物所在地:上海上海市

地: 進口、國產

更新時間:2023-06-28 13:33:10

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人急性早幼粒白血病細胞;HL-60價格售后:收到細胞后7天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時致銷售人員,我們將盡快為您解決。

人急性早幼粒白血病細胞;HL-60價格質量保證:

我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,*進口來源,*保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

人急性早幼粒白血病細胞;HL-60價格操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。

2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。

人急性早幼粒白血病細胞;HL-60價格【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細胞名稱

人急性早幼粒白血病細胞;HL-60價格

形態特性  淋巴母細胞樣

生長特性 懸浮生長

特征特性  該細胞由Collins SJ從一位患有急性早幼粒細胞性白血病的36歲白人女性的外周血中分離建立;可自發分化,或在丁酸鹽、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、PMA刺激后可分泌TNF-α。該細胞具有吞噬活性和趨化反應,癌基因myc陽性,表達補體受體和FcR(來源于藥物所)。

培養條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS

傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況 C49

凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 陰性

STR

同工酶 同工酶鑒定

染色體

使用權限 A類


人急性早幼粒白血病細胞;HL-60價格細胞培養步驟:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。

2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

二、細胞處理:

1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。

2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

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