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紅色熒光蛋白標記人結直腸癌細胞;HCT116-RFP*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
紅色熒光蛋白標記人結直腸癌細胞;HCT116-RFP*現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產品名稱 | 紅色熒光蛋白標記人結直腸癌細胞;HCT116-RFP* |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱 紅色熒光蛋白標記人結直腸癌細胞;HCT116-RFP*
形態特性 上皮樣;多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 RFP穩定表達
培養條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
紅色熒光蛋白標記人結直腸癌細胞;HCT116-RFP*運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
注意:*次植入后,在6-16小時內更換培養基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數據,用于證明細胞的真實性,并且幫助客戶更多的了解細胞特性。
90207-10 JM109 化學感受態細胞 0.1mL×10
90208-10 SURE 化學感受態細胞 0.1mL×10
90211-100 低載量 PCR 片段純化試劑盒 100 次
90211-50 低載量 PCR 片段純化試劑盒 50 次
90212-100 高載量 PCR 片段純化試劑盒 100 次
90212-50 高載量 PCR 片段純化試劑盒 50 次
90301-25 RNA 級 Oligo(dT) 纖維素 25mg
90302-5 MgCl2溶液,25mM,PCR 級 5mL
90303-1 硅膠膜 DNA 離心吸附柱 ( 大提 ) 1套
90306A-100 胰酶消化液 ( 含 EDTA) 100mL
90306B-100 胰酶消化液 ( 無 EDTA) 100mL
90307-100 青鏈霉素溶液 100mL
90308-25 親和硅烷 25mL
90309-100 紅細胞裂解液 B 型 ( 流式細胞分析用 ) 100mL
90311-100 Tricine 干粉,電泳級 100g
90313-250 TBE 電泳液 ,10× 250mL
90313-2500 TBE 電泳液 ,10× 2500mL
90314-50 柱式尿液 DNAout 50 次
90315-100 非凍型尿液 DNA 保存液 100mL
90315-15 非凍型尿液 DNA 保存液 15mL
90317-30 一站式 DNA 尿素 -PAGE 電泳套裝 30 次
90318-50 柱式 DNA 清除劑 50 次
90402-50 蛋白膠微量回收試劑盒 50 次
90403-5 蛋白膠中量回收試劑盒 5次
90404-50 柱式植物 RNAout 2.0 50 次
90407A-5 lambda(λ)DNA 5μg
90407B-5 lambda(λ)DNA 5μg
90407C-5 lambda(λ)DNA 5μg
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