蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant 5'-Nucleotidase, Mitochondrial (NT5M)

dNT-2; dNT2; mdN; 5'(3')-deoxyribonucleotidase, mitochondrial

型號(hào)：GOY-01D2479

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：23.7kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Val30~Arg209 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

半乳糖苷酶β(GLb)重組蛋白英文名稱：Recombinant Galactosidase Beta (GLb)GL-B; b-GAL; bGAL; ELNR1; EBP; GLB1; Lactase; Elastin Receptor 1,67kDa; Elastin Receptor 1(67kD); Acid Beta-Galactosidase物種：Mouse，小鼠

支鏈轉(zhuǎn)氨酶1(BCAT1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Branched Chain Aminotransferase 1, Cytosolic (BCAT1)BCT1; ECA39; Branched-chain-amino-acid aminotransferase, cytosolic物種：Rat，大鼠

組蛋白脫乙酰基酶9(HDAC9)重組蛋白英文名稱：Recombinant Histone Deacetylase 9 (HDAC9)HD7; HDAC; HDAC7; HDAC7B; HDAC9B; HDAC9FL; HDRP; MITR; Histone deacetylase-related protein; MEF2-interacting transcription repressor MITR; Histone deacetylase 7B物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

球形芽胞桿菌 Bacillus sphaericus香菇 Lentinula edodes

車葉草苷（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Asperuloside

 F9(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)cECL Western Blot Kit/低背景化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒

Galeterone (TOK001) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,CYP17抑制劑 TOK-001

 苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti威德摩爾鏈霉菌 Streptomyces wedmorensis

己（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 Pentoxifylline

 球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

山柰酚-3-槐二糖-7-鼠李糖苷 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥85%,標(biāo)準(zhǔn)品 Kaempferol 3-sophoroside-7-rhamnoside

 RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞人腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

波必利（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定 Clebopride

 宇佐美曲霉 Aspergillus usamiiMLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞

醉魚(yú)草皂苷IVb（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Buddlejasaponin Ivb

 松塔牛肝菌 Strobilomyces strobilaceus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 Erdosteine

 小鼠白血病細(xì)胞始旋鏈霉菌 Streptomyces pristinae

吡美莫司;匹美莫司 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR Pimecrolimus

線粒體-5'-核苷酸酶(NT5M)重組蛋白大鼠2 ug pOTB7 TOMM34 pOTB7 TOMM34 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

500mL Tris-Tricine-SDS Buffer,10X   Tris-Tricine-SDS Buffer,10X   常溫保存

人登革熱(DF)抗體(IgG)免疫試劑盒

大鼠β-轉(zhuǎn)導(dǎo)重復(fù)相容蛋白(β-TrCP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

50T 綿羊痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

豬胎球蛋白A 免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

瓊脂培養(yǎng)基F(紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂) Agar Medium F(Violet Red Bile Glucose Agar) 250g

2 ug pGTf2 pGTf2 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

2 ug pET-30 Xa/LIC pET-30 Xa/LIC 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人水痘帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)免疫試劑盒

100mL Imidazole Buffer（咪唑緩沖液）,0.5M,pH6.5  Imidazole Buffer,0.5M,pH6.5  常溫保存