蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)

HtrA; L56; ORF480; PRSS11; HtrA Serine Peptidase 1; Protease,Serine,11; IGFBP5-Protease; High-temperature requirement A serine peptidase 1

型號：GOY-01D2053

酶與激酶

物種：Escherichia coli(大腸桿菌)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預測分子量：15.4kDa

實際分子量：16kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ala10~Gly146 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：5.7

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

基質金屬9(MMP9)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase物種：Horse，馬

基質金屬3(MMP3)真核蛋白英文名稱：Eukaryotic Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1物種：Human，人

蛋白激酶Cζ(PKCz)重組蛋白英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Zeta (PKCz)PKC2; PKC-Z; PRKCZ; Protein Kinase M Zeta物種：Rat，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

人腺細胞英文名稱：MCF-7

醋林 質量規格：純度大于98% Triptorelin Acetate

 大鼠胰島素細胞英文名稱：INS-1

鹽萬古 質量規格：≥900μg/mg,USP33,BR Vancomycin HCl

 牛奶蛋白胨/蛋白胨C/Peptonized milkBR100/500克國產/進口

凡德他尼 質量規格：>99%,可用于細胞培養 Vandetanib

 伊紅美蘭平板/EMB Agar Plate10塊國產/進口

鹽萬古(標準品) 質量規格：含量測定 Vancomycin HCl

 /孢他啶/孢他定/孢噻甲羧肟/孢塔齊定/噻甲肟孢菌素//Ceftazidime添加于100mlHB41553毫克/支×5國產/進口

酒石伐倫克林 質量規格：>98% Varenicline Tartrate

 LIM培養基/賴氨吲哚動力培養基/賴氨靛基質動力培養基/LIM Medium用于鏈球菌的分離培養；細菌的賴氨、吲哚和動力復合生化試驗250克國產/進口

酒石伐倫克林(標準品) 質量規格：HPLC≥98%,標準品 Varenicline Tartrate

 人胃粘膜上皮細胞培養基100mL

酒石長春瑞賓/重酒石長春瑞賓 質量規格：>98%,USP,BR Vinorelbine Tartrate

 大鼠關節軟骨細胞培養基100mL

重酒石長春瑞賓(標準品) 質量規格：HPLC≥98%,標準品 Vinorelbine Tartrate

高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白(大腸桿菌大鼠凋亡相關因子配體(FASL)免疫試劑盒進口、分裝

2 ug pOPI3CAT pOPI3CAT 低溫運輸，-20℃保存

馬黃體生成素(LH)免疫試劑盒現貨供應

2 ug pCMV-Flag-N pCMV-Flag-N 低溫運輸，-20℃保存

大鼠鈣網蛋白(CRT)免疫試劑盒進口、組裝

胰酪大豆胨液體培養基（TSB）  250ml*20瓶

豬白介素6(IL-6)免疫試劑盒進口、組裝

2 ug pNEBRX1-hygro pNEBRX1-hygro 低溫運輸，-20℃保存

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH6.8   Tris-HCl Buffer,1.0M,pH6.8   常溫保存

大鼠轉化生長因子β2(TGF-β2)免疫試劑盒進口、組裝

肉湯培養基D Broth medium D (Lactose monohydrate broth) 250g