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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-15 14:13:54瀏覽次數(shù):143次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D1843 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Cyclin Dependent Kinase 5 (CDK5) |
物種 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白大鼠 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) | GOY-01D1843 |
英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 5 (CDK5)
PSSALRE; CDKN5; Cell division protein kinase 5; Serine/threonine-protein kinase PSSALRE; Tau protein kinase II catalytic subunit;TPKII catalytic subunit
型號(hào):GOY-01D1843
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
酶與激酶
神經(jīng)科學(xué)
發(fā)育科學(xué)
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測(cè)分子量:27.12kDa
實(shí)際分子量:27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Asp92~Gln273 with Two N-terminal Tags, His-tag and SUMO-tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):6.3
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
碳酸酐酶Ⅲ(CA3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase III, Muscle Specific (CA3)CA-III; CAIII; Car3; Carbonate dehydratase III物種:Rat,大鼠
非ATP酶體26S亞基8(PSMD8)重組蛋白英文名稱:Recombinant Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 8 (PSMD8)S14; Nin1p; p31; HIP6; HYPF; Rpn12; 26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 8; 26S proteasome regulatory subunit RPN12物種:Human,人
神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal (NOS1)NOS; nNOS; IHPS1; NC-NOS; N-NOS; bNOS; Neuronal NOS; Constitutive NOS; NOS type I; Nitric Ocide Synthase; Peptidyl-cysteine S-nitrosylase NOS1物種:Human,人
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
27α羥化酶抗體 CYP27A1 0.2ml
磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體 phospho-DNA PK/PRKDC(Thr2609) 0.1ml
磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 phospho-EGFR (Tyr1092) 0.1ml
14/膜型1抗體 ST14/MTSP1 0.2ml
載脂蛋白A4抗體 ApoA4 0.1ml
鐵調(diào)節(jié)蛋白2抗體 Aconitase 2/ACO2 0.2ml
5-羥色胺受體3抗體 5-HTR3 0.1ml
AEG-1抗體 AEG-1/LYRIC 0.2ml
巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體 MCSF/M-CSF 0.1ml
8抗體 PRSS8 0.1ml
轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 SOX9/SRA1 0.1ml
心肌蘭尼堿受體抗體(腦肌蘭尼堿受體) Ryanodine Receptor 0.2ml
周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白大鼠擬熱帶假絲酵母
紫色小單孢菌(絳紅小單孢菌) 慶大菌或
粉狀畢赤酵母
Lysobacterruishenii 模式菌株
越南伯克霍爾德氏菌
海氏腸球菌 的含量測(cè)定,檢測(cè)莫能菌素,品質(zhì)控制,測(cè)試殺菌劑
拜氏梭菌 產(chǎn)丁醇
棲土曲霉
大腸埃希氏菌(大腸桿菌) 測(cè)定維生素B12
Sphingomonaspituitosa 模式菌株
Shimiamarina 模式菌株
肺炎鏈球菌 呼吸研究,質(zhì)量控制菌株。
Sphingobiumrhizovicinum 模式菌株
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