蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant WW Domain Containing E3 Ubiquitin Protein Ligase 2 (WWP2)

AIP2; WWp2-like; Atrophin-1-interacting protein 2; NEDD4-like E3 ubiquitin-protein ligase WWP2

型號：GOY-01D1750

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞核

預(yù)測分子量：35.9kDa

實際分子量：34kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：His601~Glu870 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：5.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

過氧化氫酶(CAT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Catalase (CAT)酶與激酶物種：Rat，大鼠

糖磷酸異構(gòu)酶1(TPI1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Triosephosphate Isomerase 1 (TPI1)TIM; Triose-phosphate isomerase物種：Mouse，小鼠

三肽基肽酶Ⅱ(TPP2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Tripeptidyl Peptidase II (TPP2)Tripeptidyl aminopeptidase物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

鋅指蛋白230抗體 ZNF230/RNF141 0.2ml

環(huán)指蛋白138抗體 RNF138 0.2ml

鋅指蛋白103抗體 KF1/ZFP103 0.2ml

腦蛋白CG6抗體 Brain protein CG6 0.2ml

 16號染色體開放閱讀框7抗體 C16orf7/ATP-BL 0.2ml

2號染色體開放閱讀框55抗體 C2orf55 0.2ml

JWA蛋白抗體 JWA 0.2ml

G蛋白α抑制蛋白2抗體 G protein alpha Inhibitor 2 0.2ml

激活素受體1B抗體 Activin A Receptor Type IB 0.2ml

神經(jīng)元X連鎖蛋白抗體（兒童自閉癥相關(guān)蛋白） NLGN4X 0.2ml

腦發(fā)育同源蛋白1抗體 DBX1 0.2ml

銅轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)β鏈抗體 ATP7B 0.1ml

含WW域E3泛素蛋白連接酶2(WWP2)重組蛋白人Methyl thiouracil 甲硫脲100g瓶

Ibuprofen 25g瓶

Acacetin 金合歡素480-44-420mg

L-Lysine L-賴25g瓶

Daidzein 大豆苷元486-66-820mg

Glutathionereductase 還原酶(來源于釀酒酵母)100u瓶

Tilmicosin 5g瓶

pH計電極保存液50ml瓶

Nobiletin 川陳皮素478-01-320mg

0.4% TTC染色液100ml瓶

anti-α-Tubulin Mouse Monoclonal antibody100ul瓶

Polysaccharide 靈芝多糖20mg

HE染色試劑盒3×100ml瓶