蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Acid Sphingomyelinase (ASM)

SMPD1; NPD; SMase; aSMase; Sphingomyelin Phosphodiesterase 1,Acid Lysosomal; Simply Sphingomyelinase

型號：GOY-01D450

酶與激酶

代謝通路

神經科學

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：溶酶體

預測分子量：33.8kDa

實際分子量：30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：His319~Pro579 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：6.6

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Fucosyltransferase 1 (FUT1)  產品名稱：巖藻糖基轉移酶1(FUT1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Polyamine Oxidase (PAOX)  產品名稱：多胺氧化酶(PAOX)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Beta-1,3-Glucuronyltransferase 3 (b3GAT3)  產品名稱：β-1,3-葡糖醛酸基移酶3(b3GAT3)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Leucyl tRNA Synthetase (LARS)  產品名稱：亮氨酰tRNA合成酶(LARS)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Carbohydrate Synthase 3 (CHSY3)  產品名稱：糖合酶3(CHSY3)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Microtubule Associated Monoxygenase, Calponin And LIM Domain Containing Protein 2 (MICAL2)  產品名稱：含微管關聯單氧化酶調寧蛋白LIM域蛋白2(MICAL2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

抗表皮生長因子抗體 EGF

小鼠抗表皮生長因子抗體 EGF

內皮細胞受體蛋白激酶A2+A3+A4抗體 Eph receptor A2+A3+A4

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磷酸化內皮細胞受體蛋白激酶A3+A4+A5抗體 phospho-EPH A3+A4+A5 ( Tyr779)

轉錄因子Ets差異基因5抗體 Etv5

E選擇素抗體 E-Selectin

大腸桿菌耐熱性腸毒素抗體 heatstable enterotoxin 1 [Escherichia coli]

表皮生長因子受體抗體 EGFR

Ets轉錄因子家族ets1抗體 ETS1

泛素激活酶E1抗體 E1 Ubiquitin Activating Enzyme

早期B淋巴細胞因子1抗體 EBF1

酸性神經鞘磷脂酶(ASM)重組蛋白人基質重塑關聯蛋白5(MXRA5)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Remodelling Associated Protein 5 (MXRA5)

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Campy-Cefex添加劑/Campy-Cefex Supplement添加于200ml CAMPY-CEFEX基礎中2毫升×10支國產/進口

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RM-1(小鼠前列腺細胞)5×106cells/瓶×2

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