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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-06 10:19:43瀏覽次數(shù):166次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D395 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Dopachrome Tautomerase (DCT) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
英文名稱:Recombinant Thiosulfate Sulfurtransferase (TST) 產(chǎn)品名稱:硫代鹽轉(zhuǎn)硫酶(TST)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Cytochrome P450 17A1 (CYP17A1) 產(chǎn)品名稱:細(xì)胞色素P450 17A1(CYP17A1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant 2',3'-Cyclic Nucleotide 3'-Phosphodiesterase (CNP) 產(chǎn)品名稱:2',3'-環(huán)核苷酸3'-磷酸二酯酶(CNP)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
多巴色素異構(gòu)酶(DCT)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D395 |
英文名稱:Recombinant Dopachrome Tautomerase (DCT)
TYRP2; TRP-2; DT; Dopachrome Delta-Isomerase; Tyrosine-Related Protein 2; L-dopachrome Delta-isomerase
型號(hào):GOY-01D395
酶與激酶
腫瘤免疫
激素代謝
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜
預(yù)測(cè)分子量:30.8kDa
實(shí)際分子量:31kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Val28~Gly263 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):8.5
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
D激酶衰減蛋白1抗體 DOK1
雙甲基水解酶2抗體 DDAH2
雙特異性磷酸化調(diào)節(jié)激酶3抗體 DYRK3
肌營(yíng)養(yǎng)蛋白α抗體 Dystrobrevin alpha
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抑癌基因抗體 GP340
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死亡受體3抗體 DR3
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DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3β抗體 Dnmt3 Beta
精神分裂癥易感基因抗體 DTNBP1
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亞酸鹽增菌液/SE增菌液/SE培養(yǎng)基/Selenite Enrichment Medium增殖標(biāo)本中的沙門氏菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
髓過(guò)氧化物酶(MPO)重組蛋白英文名稱:Recombinant Myeloperoxidase (MPO)
人胎盤絨毛膜細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
CHO(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
4-甲基傘形酮-β-D-半糖苷肉湯/MUGal肉湯/MUGal Broth用于多管發(fā)酵法快速檢測(cè)大腸菌群20克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Hoagland Complete MediumBR20升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
HCC38(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
FMS樣激酶3(Flt3)重組蛋白英文名稱:Recombinant FMS Like Tyrosine Kinase 3 (Flt3)
結(jié)腸耐藥株英文名稱:LOVO/Adr
Clock同源物(CLOCK)重組蛋白英文名稱:Recombinant Clock Homolog (CLOCK)
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