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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-06 10:06:46瀏覽次數(shù):197次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D374 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Extracellular Signal Regulated Kinase |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D374 |
英文名稱:Recombinant Extracellular Signal Regulated Kinase 2 (ERK2)
MAPK1; P38; P40; ERK2; ERT1; MAPK2; P42MAPK; P42-MAPK; PRKM1; PRKM2; P41; P41mapk; P41-mapk; Mitogen-Activated Protein Kinase 1; Mitogen-activated protein kinase 2
型號(hào):GOY-01D374
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
酶與激酶
腫瘤免疫
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:-
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
英文名稱:Recombinant Geranylgeranyl Diphosphate Synthase 1 (GGPS1) 產(chǎn)品名稱:異戊二烯基二磷酸合酶1(GGPS1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Guanidinoacetate-N-Methyltransferase (GAMT) 產(chǎn)品名稱:胍乙酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(GAMT)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Protein Tyrosine Kinase 2 Beta (PYK2) 產(chǎn)品名稱:蛋白激酶2β(PYK2)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Aminoadipate Semialdehyde Synthase (AASS) 產(chǎn)品名稱:氨基乙二酸半醛合酶(AASS)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Phosphoglucomutase 1 (PGM1) 產(chǎn)品名稱:葡萄糖磷酸變位酶1(PGM1)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Polymerase DNA Directed Alpha 1 (POLa1) 產(chǎn)品名稱:DNA指導(dǎo)聚合酶α1(POLa1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 phospho-Dnmt1(Ser732)
磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 phospho-Dnmt1(Ser154)
磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 phospho-Dnmt1(Tyr399)
7脫氫還原酶抗體 DHCR7
大腦發(fā)育同源蛋白2抗體 Dbx2
退行性精母細(xì)胞同源物1抗體 DEGS1
DSCC1蛋白抗體 DSCC1
誘捕受體2抗體 DcR2
減數(shù)分裂同源蛋白DMC1抗體 DMC1
DNA連接酶3抗體 DNA Ligase III
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶相關(guān)蛋白1抗體 DMAP1
磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體 phospho-DNA PKcs (Thr2638)
細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)重組蛋白人大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum扁平蟲道酵母 Ambrosiozyma manospora
A875/黑色素瘤細(xì)胞Plant Protein Extraction Kit/植物蛋白提取試劑盒
索氏梭菌 Clostridium sordellii氣單胞菌屬 Aeromonas sp.
黑木耳 Auricularia auricula小鼠骨肉瘤
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicumMEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基
毛鬼傘,雞腿菇 Coprinus comatus植物桿菌 Lactobacillus plantarum
廣譜彩虹預(yù)染蛋白Marker小鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基
SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞)
銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosa黃叉曲霉 Aspergillus flavo-furcatis
苜蓿中華根瘤菌大鼠子宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosusNCI-H2452(人間皮瘤細(xì)胞)
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilusCHO, 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系
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