蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase I (CA1)

CA-I; CAI; Car1; CAB; Carbonic anhydrase B; Carbonate dehydratase I

型號：GOY-01D362

酶與激酶

骨骼代謝

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞質, 染色體

預測分子量：24.1kDa

實際分子量：24kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Asp15~Gln223 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：6.5

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Ribonuclease A9 (RNASE9)  產品名稱：核糖核酸酶A9(RNASE9)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Peptidase Inhibitor 16 (PI16)  產品名稱：肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Beta-1,3-N-Acetylglucosaminyltransferase Manic Fringe (MFNG)  產品名稱：β-1,3-N-乙酰葡糖胺基轉移酶Manic Fringe(MFNG)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Lactate Dehydrogenase A (LDHA)  產品名稱：乳酸脫氫酶A(LDHA)重組蛋白物種：Sus scrofa; Porcine (Pig，豬)

英文名稱：Recombinant Beta-1,3-N-Acetylglucosaminyltransferase Manic Fringe (MFNG)  產品名稱：β-1,3-N-乙酰葡糖胺基轉移酶Manic Fringe(MFNG)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Aminopeptidase A (ENPEP)  產品名稱：谷氨氨肽酶(ENPEP)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

二氫嘧啶抗體 Dihydropyrimidinase

DYDC1蛋白抗體 DYDC1

脫磷酸結構域蛋白抗體 DCAKD

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DENND2A蛋白抗體 DENND2A

耳聾常染色體顯性遺傳相關蛋白1抗體 DIAPH1

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人大腸細胞HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系

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CAL-27(人舌鱗細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

蠟蚧輪枝菌 Verticillum lecanii好食脈孢菌

無丙二酸檸檬酸桿菌 Citrobacter amalonaticus小鼠內臟脂肪細胞培養基

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicumHCT-15(人結腸細胞)

人心肌成纖維細胞培養基BT-549(人腺管細胞)

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis酒假絲酵母 Candida kefyr

雞胚成纖維細胞地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

雪白根霉厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaePANC-1, 人胰腺細胞