產品屬性：

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2 Group VII (LpPLA2)

PLA2G7; PAF-AH; PAFAH; Lp-PLA2; LDL-PLA2; Platelet Activating Factor Acetylhydrolase,Plasma; Phospholipase A2,Group VII; LDL-associated phospholipase A2; Phospholipase A2, Lipoprotein Associated

型號：GOY-01D354

酶與激酶

代謝通路

感染免疫

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌, 細胞外基質

預測分子量：48.1kDa

實際分子量：48kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Phe22~Asn440 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：6.6

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
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操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

微管結合蛋白CYLD抗體 CYLD

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磷酸化CBX5抗體 Phospho-CBX5 (Tyr37)

氯抗體 Chloramphenicol

磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 phospho-c-Abl (Tyr89)

磷酸化細胞質膜微囊蛋白-1抗體 Phospho-Caveolin-1 (Tyr14)

磷酸化周期素依賴激酶2抗體 Phospho-cdc2 (Thr161)

磷酸化周期素依賴性激酶2抗體 Phospho-CDK2 (Thr160)

細胞質膜微囊蛋白-3抗體 Caveolin-3

磷酸化細胞分裂周期蛋白25C抗體 Phospho-cdc25C (Thr48)

3號染色體開放閱讀框34抗體 C3Orf34

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毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes白地霉 Geotrichum candidum

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vignaNCI-H446(人小細胞肺細胞)

Bacterial Protein Extraction Reagent/細菌蛋白抽提試劑 細胞名稱

繩狀青霉 Penicillium funiculosum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人肺細胞真核細胞膜蛋白抽提試劑（帶酶抑制劑）

人胰腺星狀細胞培養基RF/6A(猴視網膜血管內皮細胞)

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根瘤菌MDA-MB-231, 人腺細胞

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毛木耳 Auricularia polytricha植物桿菌 Lactobacillus plantarum