蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：基質金屬蛋白酶9(MMP9)重組蛋白小鼠

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)

GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase

型號：GOY-01D221

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

心腦血管

肝膽病學

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌, 細胞外基質

預測分子量：19.6kDa

實際分子量：20kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ser225~Asp390 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：6.2

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)  產品名稱：碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Neprilysin (CD10)  產品名稱：腦啡肽酶(CD10)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 12 (ADAMTS12)  產品名稱：血小板反應蛋白解整合素金屬肽酶12(ADAMTS12)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant (ACP5)  產品名稱：耐酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)重組蛋白物種：Oryctolagus cuniculus (Rabbit，兔)

英文名稱：Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 5 (ADAM5)  產品名稱：解整合素金屬5(ADAM5)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Lysozyme (LZM)  產品名稱：(LZM)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340)

趨化因子受體1抗體 CX3CR1

磷酸化致癌基因C-Myc抗體 phospho C-Myc(Thr58/pSer62)

CD33抗體 CD33

磷酸化原癌基因c-kit抗體 phospho-c-kit(Tyr936)

磷酸化原癌基因c-Jun抗體 phospho-c-Jun(Thr91+Thr93)

氯離子通道蛋白3抗體 CLCN3

磷酸化周期素E抗體 phospho-Cyclin E (Thr395)

磷酸化周期素依賴性激酶9抗體 Phospho-CDK9 (Thr186)

磷酸化Connexin 43蛋白抗體 Phospho-Connexin 43 (Ser368)

磷酸化細胞分裂周期蛋白25C抗體 Phospho-cdc25C (Ser216)

絲切蛋白抗體 cofilin

基質金屬蛋白酶9(MMP9)重組蛋白小鼠小鼠腸靜脈內皮細胞培養基蛹蟲草(北冬蟲夏草，北蟲草) Cordyceps militaris

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes尖頂羊肚菌 Morchella conica

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus

人皮膚成纖維樣細胞人卵巢細胞

HL-60, 人早幼粒白血病細胞人腦動脈血管平滑肌細胞培養基

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum牛鏈球菌 Streptococcus bovis

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae金橫裂鏈霉菌 Streptomyces aureosegmentosus

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

桿菌屬 Lactobacillus sp.燼灰鏈霉菌 Streptomyces cinereogriseus

U14(小鼠子宮頸細胞)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.FLAG標簽免疫親和介質

低分化鼻咽細胞屬 Serratia sp.

異常漢遜酵母 Hansenula anomala磚紅鐮孢