產品屬性：

產品名稱：內皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)

EL; EDL; Endothelial Lipase; Endothelial cell-derived lipase

型號：GOY-01D208

酶與激酶

代謝通路

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：30.5kDa

實際分子量：30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ala175~Ile412 (Accession # Q9Y5X9) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
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操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

氧化酶5A抗體 COX5A

3號染色體開放閱讀框19抗體 C3orf19

卷曲螺旋結構域蛋白60抗體 CCDC60

卷曲螺旋結構域蛋白144A抗體 CCDC144A

周期素B3抗體 Cyclin B3

羧肽酶X(M14家族2)抗體 CPXM2

上皮鈣粘附分子結合蛋白E7 Ecadherin binding protein E7

周期素D結合蛋白1抗體 CCNDBP1

卷曲螺旋結構域蛋白23抗體 CCDC23

卷曲螺旋結構域蛋白89抗體 CCDC89

卷曲螺旋結構域蛋白120抗體 CCDC120

卷曲螺旋結構域蛋白30抗體 CCDC30

內皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白人解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

小鼠肝動脈內皮細胞培養基人前列腺上皮細胞培養基

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicumECV-304(人臍靜脈內皮細胞)

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosusHUVEC-12, 人臍靜脈血管內皮細胞系

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum異常漢遜酵母 Hansenula anomala

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

丹參酮IIAU-2 OS, 人骨肉瘤細胞

嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus蘇云金芽胞桿菌日本亞種 Bacillus thuringiensis subsp. japanensis

SF763(人腦瘤細胞)SW 780(人膀胱移行細胞)

無花果曲霉 Aspergillus ficuumMS1(小鼠胰島內皮細胞)

COLO全細胞裂解液釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

黑綠木霉刺芹側耳 Pleurotus eryngii

CTLL-2(小鼠T細胞)根土壤桿菌 Agrobacterium tumefaciens