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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100管/48樣 |
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貨號 | GOY-01S6545 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅用于科研 |
產品名稱:ATP微量法測試盒
規格 : 100管/48樣
測試方法: 微量法
貨號:GOY-01S6545
分類:氧化磷酸化系列
商品介紹:
ATP廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細胞能量代謝狀態的主要參數。測定ATP含量并且計算能荷,能夠反映能量代謝狀態。
測定原理:
肌酸激酶催化肌酸和ATP反應生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量,以此反應ATP含量。
自備儀器和用品:
分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g。
eIF4E結合蛋白抗體 卵泡刺激素結合蛋白2抗體
肝配蛋白A1受體抗體 卵泡刺激素結合蛋白1抗體
胚胎干細胞相關轉錄因子1抗體 卵0酯膽固醇酰基轉移酶抗體
CD312抗體 卵黃狀黃斑病蛋白抗體
FLAG Tag標簽抗體(C端) 卵黃狀黃斑病蛋白4抗體
快速瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 50次
快速瑞氏-姬姆薩復合染液 30ml×1、60ml×1 250ml×3 500ml×3
快速質粒小提試劑盒 50次
奎寧酸含量試劑盒
昆蟲蛋白提取試劑盒100T
ATP微量法測試盒肺炎克雷伯菌CMCC46117凍干粉 毛殼
葡萄芽假絲酵母 干酪棒桿菌(乳酪棒桿菌)
短小芽孢桿菌 枯草芽孢桿菌CMCC63501凍干粉南京便診
松生擬層孔菌 生孢梭菌(產芽孢梭狀芽孢桿菌)
兩型孢毛霉 納地青霉
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