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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50管/24樣 |
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貨號 | GOY-01S6743 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅用于科研 |
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產品名稱:β半乳糖苷酶(βGAL)可見分光光度法測試盒
規格 : 50管/24樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6743
分類:糖代謝系列
商品介紹:
β-GAL(EC 3.2.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,能夠催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷鍵水解,此外還具有轉半乳糖苷的作用。β-GAL不僅可為植物的快速生長釋放儲存的能量,還能在正常的多糖代謝、細胞壁組分代謝以及衰老時細胞壁降解過程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖殘基的水解,釋放自由的半乳糖。
測定原理:
β-GAL分解對-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算β-GAL活性。
自備用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
鈣網蛋白抗體 神經管畸形相關蛋白VANGL2抗體
膽固醇21-羥化酶抗體 神經干細胞抑制相關蛋白TRIM32抗體
畸胎瘤衍化生長因子抗體(C端) 神經干細胞樹突調節蛋白DAGLα抗體
補體C1qL3鏈多肽抗體 神經甘丙肽樣肽GALP抗體
COG1蛋白抗體 神經鈣傳感蛋白1抗體
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β半乳糖苷酶(βGAL)可見分光光度法測試盒孢囊桿菌 表皮葡萄球菌ATCC12228凍干粉
栗酒裂殖酵母 雅致枝霉
綠色木霉=木素木霉 紅法夫酵母
煙曲霉 Slackiaequolifaciens 模式菌株
毛木耳(紫木耳、黃背木耳) 長赤細菌 模式菌株,產生細菌葉綠素
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g。
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