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上海谷研實業(yè)有限公司
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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>核酸擴增>> 1mL熒光定量PCR Mix(染料法)

熒光定量PCR Mix(染料法)

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號1mL

品       牌R&D/美國

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-22 13:50:26瀏覽次數(shù):299次

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供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 GOY-F10254
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研使用
熒光定量PCR Mix(染料法)公司正*的各種產(chǎn)品細(xì)胞基質(zhì)金屬(MMP)總活性比色法定量檢測試劑盒
組織基質(zhì)金屬(MMP)總活性比色法定量檢測試劑盒
體液基質(zhì)金屬(MMP)總活性比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞基質(zhì)金屬(MMP-1)活性熒光定量檢測試劑盒
組織基質(zhì)金屬(MMP-1)活性熒光定量檢測試劑盒

DNA提取流程圖:

QQ截圖20220414142532.png

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

貨號

熒光定量PCR   Mix(染料法)

2×SYBR qPCR Mix

1mL

GOY-F10254

產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

本產(chǎn)品是基于熒光染料檢測的即用型PCR試劑盒,可以對靶片段進行實時定量PCR分析(qPCR)。產(chǎn)品含有經(jīng)過優(yōu)化的緩沖液組分、Taq DNA聚合酶、dNTPsMgCl2及熒光染料等所有實時定量PCR所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行實時定量PCR反應(yīng)和HRM分析,具有廣泛的用途。

產(chǎn)品特點:

方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進行實時定量PCR實驗。

使用第三代飽和型熒光染料,信號強,不會抑制PCR反應(yīng)。

快捷,即用型的預(yù)配液使加樣操作步驟大大簡化,避免了交叉污染,降低實驗誤差。

各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強。能檢測到濃度為50拷貝/mL的靶分子。

保存:-20℃,有效期6個月。

 

操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅
b.
單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染。
c
.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅
7.
把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
人脂肪酶(Lipase)ELISA試劑盒              2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone  中文名:  分子式:C11H7NO4 

人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒     2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone  103646-20-4  中文名:  分子式:C11H7NO4  度:%  關(guān)鍵詞: 

人脂多糖結(jié)合蛋白elisa試劑盒   人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒、人脂多糖結(jié)合蛋白elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  2-Benzylacrylic acid  5669-19-2  中文名:  分子式:C10H10O2 

人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit                 2-Aminophenyl phenyl sulfone  中文名:2-氨基二苯砜  分子式:C12H11NO2S 

人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒     2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone  103646-20-4  中文名:  分子式:C11H7NO4
氯化血紅素;血晶素  Hemin  質(zhì)量規(guī)格:0.98 大鼠抗IVIgG抗體ELISA檢測試劑盒Ratai-IVIgGaibodyELISAKit 96T/48T

5- 羧基熒光素二乙酸酯;5-CFDA  5-Carboxyfluorescein diacetate  質(zhì)量規(guī)格:0.95 人雌二(E2)試劑盒 Human Esadiol,E2 ELISA Kit

5(6)-羧基熒光素二乙酸酯  5(6)-Carboxyfluorescein diacetate  質(zhì)量規(guī)格:0.9 RatsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

5-氨基熒光素  5-Aminofluorescein  質(zhì)量規(guī)格:>95% IL蛋白共沉淀分析試劑盒5

6-氨基熒光素  6-Aminofluorescein  質(zhì)量規(guī)格:0.95 NudeMouseClaracellprotein,CC16ELISA試劑盒裸鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

5(6)-氨基熒光素  5(6)-Aminofluorescein  質(zhì)量規(guī)格:0.9 小鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA 試劑盒

5-FAM, SE5-羧基熒光素琥珀酯  5-Carboxyfluorescein N-succinimidyl ester  質(zhì)量規(guī)格:0.9 Rat soluble cell differeiation aigen 14 (sCD14) ELISA Kit 大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原14(sCD14)ELISA試劑盒

5,6-FAM5(6)-羧基熒光素  5(6)-Carboxyfluorescein  質(zhì)量規(guī)格:0.95 Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit 人酸誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

5(6)-FAM, SE; 5(6)-羧基熒光素琥珀酯  5(6)-FAM, SE   質(zhì)量規(guī)格:>90% Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNPELISA試劑盒人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

S-腺苷-L-;S-腺苷甲硫  S-adenosyl-L-mine (SAM)  質(zhì)量規(guī)格:BR,>96%,干品腺苷蛋>49% 植物精(arginine)含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20
熒光定量PCR Mix(染料法)植物亞硝酸鹽還原酶總活性比色法定量檢測試劑盒

藻類細(xì)胞硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒

真菌/酵母細(xì)胞硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒

植物硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒

植物谷氨酰半胱合成酶(glutamyl systeine synthetase)活性比色法定量檢測試劑盒

實驗步驟
(1)
實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(
在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))


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