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小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)elisa試劑盒實驗方法 英文名稱:Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題,收貨后十五個工作日內包退換
小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)elisa試劑盒實驗方法一、標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)elisa試劑盒實驗方法二、注意事項
1. 此試劑為體外檢測試劑,效期內使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
2. 使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結晶后,請于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結晶后,請于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時內進行實驗,標本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。
6. 在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應注意輕微搖動微孔反應條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內標示。
三、實驗前準備
1.使用前應將盒內各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液
5.用應用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
鎂孔雀綠增菌液/鎂孔雀綠湯/RV湯/MM,RV Medium沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)250克國產/進口
大鼠氣管和支氣管上細胞*培養(yǎng)基100mL
沙氏瓊脂培養(yǎng)基/Sabouraud′s Agar用于真菌檢測250克國產/進口
TRX標簽蛋白裂解液100ug20μg、100μg
SW620(人結腸細胞)5×106cells/瓶×2
SOB湯/SOB BrothBR250克國產/進口
rCF, 大鼠心臟成纖維細胞gersion
糖發(fā)酵基礎湯/Bromcersol Purple Broth Base微生物檢驗中各種糖發(fā)酵實驗,無菌加入各種糖醇類物質250克國產/進口
TBS500ml國產
SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
PVDF膜(0.22um)26.5cm × 3.75m,12cm x 20cmgersion
BEL-7405(人肝細胞)5×106cells/瓶×2
MOLT-4全細胞裂解液100μg100μggersion
PANC-1(人胰腺細胞)5×106cells/瓶×2
HuT 78(人T淋巴細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
CA46(人Burkitts淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2
EJ(人膀胱細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腎成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
AtT-20(小鼠垂體瘤細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠白血病細胞英文名稱:L1210
1% NaC1蔗糖發(fā)酵管BR20支國產/進口
人食管細胞英文名稱:KYSE450
MRS瓊脂基礎/MRS瓊脂/MRS酸菌瓊脂/MRSA用于食品中酸菌的培養(yǎng)250克國產/進口
人晶體上細胞英文名稱:SRA01/04
膽鹽七葉苷瓊脂/Bile Esculin Agar腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)250克國產/進口
淋巴瘤英文名稱:MJ(懸浮)
鏈球菌培養(yǎng)基1萬毫升/袋國產/進口15-keto-17-phenyl trinor Prostaglandin F2α (50 mg)9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15-keto-17-phenyl trinor PGF2α; 15-keto-17-phenyl trinor Prostaglandin F2α
CAY10572 (5 mg)1,5,6,7-tetrahydro-2-(4-pyridinyl)-4H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one; PHA 767491; CAY10572
18-carboxy dinor Leukotriene B4 (250 ug)7R,14S-dihydroxy-4Z,8E,10E,12Z-octadecatetraenedioic acid; 18-carboxy dinor LTB4; 18-carboxy dinor Leukotriene B4
12(R)-HEPE (50 ug)12R-hydroxy-5Z,8Z,10E,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid; 12(R)-HEPE
2-Arachidonoyl Glycerol-d5 (1 mg)5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-glycerol-1,1,2,3,3-d5 ester; 2-AG-d5; 2-Arachidonoyl Glycerol-d5
Carbonate Buffer (1 ea)Sodium Carbonate; Carbonate Buffer
Prostaglandin D2 EIA Standard (1 ea)Prostaglandin D2 EIA Standard
13(S)-HpOTrE(γ) (5 mg)13S-hydroperoxy-6Z,9Z,11E-octadecatrienoic acid; 13(S)-HpOTrE(γ)
Nitrotyrosine EIA Antiserum (500 dtn)Nitrotyrosine EIA Antiserum
Tris-EDTA Stock Solution (10X, pH 7。4) (1 L)TE Buffer; Tris-EDTA Stock Solution (10X, pH 7。4)
Methylcarbamyl PAF C-16 (10 mg)1-O-hexadecyl-2-O-(N-methylcarbamoyl)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Methylcarbamyl PAF C-16
C-8 Ceramide-1-phosphate (1 mg)N-octanoylsphingosine-1-phosphate; C-8 Ceramide-1-phosphate
小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)elisa試劑盒實驗方法 COX-FA COX Positive Control (1 ea)COX Positive Control; COX-FA COX Positive Control
Latanoprost Lactone Diol (10 mg)(3aR,4R,5R,6aS)-hexahydro-5-hydroxy-4-[(3R)-3-hydroxy-5-phenylpentyl]-2H-cyclopenta[b]furan-2-one; Latanoprost Lactone Diol
CAY10397 (25 mg)5-[[4-(ethoxycarbonyl)phenyl]azo]-2-hydroxy-benzeneacetic acid; CK47A; CAY10397
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