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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
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貨號 | GOY-01X0708 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產品屬性:
產品名稱 | |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
貨號 | GOY-01X0708 |
名稱 雞外周血淋巴細胞
2.組織來源:外周血
3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介:
雞外周血淋巴細胞分離自外周血;所謂的外周血,即除骨髓之外的血液,就是已經被造血器官釋放入循環系統參與循環的血,它區別于造血器官內的未成熟的血細胞或未被釋放入循環的血細胞。外周血淋巴細胞(Peripheral Blood Lymphocyte)簡稱PBL,主要是血液循環中的淋巴細胞,由T細胞和B細胞組成,其中T細胞(占70%~80%)和B細胞(占20%~30%)。
5.方法簡介:
公司實驗室分離的雞外周血淋巴細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為1×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
公司實驗室分離的雞外周血淋巴細胞經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
培養操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實驗報告:
產品僅用于科研一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
共濟失調蛋白7樣2抗體
鹽耐藥蛋白ARS2抗體
芳香基硫酸酯酶1抗體
鹽轉運三磷酸腺苷酶抗體
tRNA的蛋白轉移酶1抗體
大鼠抵抗素(RETN)elisa檢測試劑盒
大鼠低氧誘導因子2α(HIF2α)elisa檢測試劑盒
大鼠低氧誘導因子1α(HIF1α)elisa檢測試劑盒
大鼠低密度脂蛋白受體相關蛋白8(LRP8)elisa檢測試劑盒
大鼠低密度脂蛋白受體相關蛋白5(LRP5)elisa檢測試劑盒
雞外周血淋巴細胞雞補體3裂解產物(C3SP)elisa分析檢測試劑盒
雞補體蛋白3(C3)elisa分析檢測試劑盒
雞補體蛋白4(C4)elisa分析檢測試劑盒
雞層連蛋白/板層素(LN)elisa分析檢測試劑盒
雞超氧化物歧化酶(SOD)elisa分析檢測試劑盒
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