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Stbl3 感受態細胞0.1 mL×10*

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所  在  地上海市

更新時間:2017-02-12 08:42:21瀏覽次數:427次

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Stbl3 感受態細胞0.1 mL×10*運輸及保存 干冰運輸、-80℃保存,避免反復凍融,有效期半年。

Stbl3 感受態細胞0.1 mL×10*規格及成分:

Stbl3 感受態細胞0.1 mL×10*產品及特點:


本產品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態細胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統中同源重組的菌株,用于產生重組 Bacmid。使用 pUC19 質粒檢測,本產品轉化效率可達 107CFU/μg。 DH10Bac 細胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位點和 lac Zα-互補因子。輔助質粒包含 tns ABCD 區域,該區域提供了 mini-Tn7 從供體質粒插入親本 Bacmid 靶位點所需要的轉座蛋白。供體如 pFastBac 系列質粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂,Tn7R 和 Tn7L 之間包含慶大霉素抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當含有靶基因 pFastBac 的重組質粒轉化到 DH10Bac 細胞后,發生重組后就可產生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉染昆蟲細胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產物可以實現β-半乳糖苷酶的α-互補現象,用于重組 bacmid 的藍白斑篩選。菌株基因型為:F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
Stbl3 感受態細胞0.1 mL×10*使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以 100 μL 感受態細胞為例。
3. 待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入 1-10 ng 重組質粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床, 200rpm 振蕩培養 4 小時。
6. 用 SOC 培養基進行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個梯度的培養物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37℃培養 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,視平板上菌落生長情況決定去留。

大鼠雪旺氏細胞*培養基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
MDA-MB-435(人腺高轉移細胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus Plantarum
酸鏈球菌 Streptococcus lactis
大鼠肝實質細胞*培養基100mL
青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolensentis
黑曲霉 Aspergillus niger
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
PANC-1(人胰腺細胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
菜豆根瘤菌 Rhizobium phaseoli
THP-1人單核白血病細胞空腸彎曲菌PCR檢測試劑盒
牛傳染性鼻氣管炎病毒PCR檢測試劑盒
人皰疹病毒6型PCR檢測試劑盒
消化道病毒多重PCR檢測試劑盒
植物種屬鑒定PCR Mix 8
大鼠26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA Kit
大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA Kit
大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA Kit
大鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA Kit
大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA Kit
大鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)ELISA Kit
大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA Kit
大鼠雙氫睪酮(DHT)ELISA Kit
大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA Kit
Stbl3 感受態細胞0.1 mL×10*大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA Kit
猴B病毒(BV)ELISA Kit
雞免疫核糖核酸(IRNA)ELISA Kit
人17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA Kit
人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA Kit
人α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA Kit

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