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小鼠腹水瘤細胞;S180-V圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠腹水瘤細胞;S180-V圖片
形態特性 圓形
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系于1980年由余慕貞等建立。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN6
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
小鼠E選擇試劑盒規格型號:96T/48T小鼠E選擇試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠E選擇試劑盒、小鼠E選擇eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
小鼠皮質類固醇受體試劑盒規格型號:96T/48T小鼠皮質類固醇受體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠皮質類固醇受體試劑盒、小鼠皮質類固醇受體eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
小鼠黃體生成釋放激試劑盒規格型號:96T/48T小鼠黃體生成釋放激試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠黃體生成釋放激試劑盒、小鼠黃體生成釋放激eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
小鼠β內酶抑制劑試劑盒規格型號:96T/48T小鼠β內酶抑制劑試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠β內酶抑制劑試劑盒、小鼠β內酶抑制劑eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
小鼠羥脯氨試劑盒規格型號:96T/48T小鼠羥脯氨試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠羥脯氨試劑盒、小鼠羥脯氨eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。100U Deep Vent DNA 聚合酶
D- 泛酸鈣 50g CAS137-08-6
Q 交換介質 50mL 130423-50
2 μg 質粒(載體)列表
5g L(+) 鼠李糖
1g 卵白蛋白
0.5 mL 基因轉染增強劑
鹽酸壯觀 1g CAS22189-32-8
一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH) 30 次 81212A-30
100 次 總抗氧化能力檢測試劑盒 (ABTS 快速法 )
0.1mL 綠如藍染料,PCR
25g 蒽酮
48 T 谷氨酰胺測試盒
核酸組蛋白 ( 小牛胸 ) 250mg CAS9064-47-5
山羊抗兔 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標記 1000 μL 140599-1000
大提柱式藻類 RNAout 5次 120504-5
10g Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 )
10mg 5′ - 二磷酸鳥苷二
5mL 周細胞生長因子
100mL DNA 異硫氰酸胍溶液,5M
小鼠粘試劑盒規格型號:96T/48T小鼠粘試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠粘試劑盒、小鼠粘eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
大鼠內脂試劑盒規格型號:96T/48T大鼠內脂試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:大鼠內脂試劑盒、大鼠內脂eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
大鼠全段甲狀試劑盒規格型號:96T/48T大鼠全段甲狀試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:大鼠全段甲狀試劑盒、大鼠全段甲狀eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
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