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雜交瘤細胞株;1C4F6價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
雜交瘤細胞株;1C4F6價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
1次 一步法 96 孔板質粒 DNAout( 離心法 )
10×100μL JM110 感受態細胞
1g 魚精蛋白硫
200mL 乙烯乙二醇
L- 羥基脯氨酸 5g CAS51-35-4
硫酸鏈溶液 ,50mg/mL 10mL 60210-10
100mL 印跡膜抗體稀釋液
250g 聚乙二醇 8000
1g 次黃嘌呤
1000U MMLV 逆轉錄酶 (H-)
青 G 鹽 1g CAS69-57-8
牛血清白蛋白標準品,2mg/mL 1mL 131070-1
1mg 重組蛋白 G
1mL LBA4404 農桿菌菌種
1000U 葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶
50 次 雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 555·7-AAD)
3- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -3- 氨基丙烷磺酸 10g CAS29915-38-6
考馬斯亮藍 G-250 染液 250mL 80812-250
5g α- 酮戊二酸
1g 氯化血紅素
2mg 抑肽酶
48 T 堿性磷酸酶測試劑盒
酪氨酸脫羧酶 25U CAS9002-09-9NIS 鈉碘轉運體蛋白抗體規格: 0.2ml
Junctophilin 3 連接蛋白JPH3抗體規格: 0.2ml
GRAP2 生因子受體結合蛋白2相關接蛋白2抗體規格: 0.2ml
NCOA3/KAT13B/AIB1/SRC-3 類固醇受體激活蛋白3抗體規格: 0.2ml
COX6B 細胞色素C氧化酶亞基6B抗體規格: 0.2ml
Nicastrin 老年性癡呆蛋白APH2抗體規格: 0.1ml
Phospho-Mre11 (Ser676) 磷酸化DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體規格: 0.1ml
C11orf21 11號染色體開放閱讀框21抗體規格: 0.2ml
Metallothionein 3 金屬硫蛋白3抗體規格: 0.2ml
MDR1/p-GP/CD243 (N-terminus) 多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體規格: 0.1ml
GDN/SERPINE2 膠質源性連接蛋白抗體規格: 0.2ml
ADAM9 去整合素樣金屬蛋白酶9抗體 0.2ml
MAP3K7IP3 NFKB激活蛋白1抗體規格: 0.1ml
Brd4/CAP 染色體相關蛋白CAP抗體規格: 0.2ml
phospho-SYN1(Ser549) 磷酸化神經突觸素1抗體 0.1ml
LFABP/FABP-1 肝臟型脂肪酸結合蛋白抗體規格: 0.2ml
DENND2D MAP激酶激活死亡域蛋白2D抗體規格: 0.2ml
plant lectin B4/IB4 植物凝集素IB4 0.2ml
KLK15 激肽釋放酶15抗體規格: 0.2ml
PITX2 成對樣同源結構域轉錄因子2抗體規格: 0.2ml
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