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雜交瘤細胞株;1-19-1價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
雜交瘤細胞株;1-19-1價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
PRAS40/AKT1 substrate 1 蛋白激酶AKT底物1抗體規格: 0.2ml
MRG15 轉錄調控因子MRG15抗體規格: 0.2ml
WSB2/WD SOCS box protein 2 信號傳導抑制蛋白WD重復蛋白2抗體規格: 0.2ml
PLCG 2/PLC gamma 2 磷酯酶Cγ2抗體規格: 0.2ml
BAP135/TFII I 蛋白酪氨酸激酶BAP135抗體規格: 0.2ml
NMT1 豆蔻酰基轉移酶1抗體規格: 0.2ml
Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2抗體規格: 0.1ml
GIRK2/Kir3.2 G蛋白激活內流鉀通道蛋白2抗體規格: 0.2ml
ORP8 氧化固醇結合蛋白8抗體規格: 0.2ml
NR2D/NMDAR2D 谷氨酸受體2D抗體規格: 0.1ml
Plakophilin 2 橋粒斑菲素蛋白2抗體規格: 0.2ml
IGFR3/CD16 FC段γ受體3/免疫球蛋白G Fc段受體III抗體規格: 0.1ml
MMP-20 基質金屬蛋白酶20抗體規格: 0.1ml
C3orf33 3號染色體開放閱讀框33抗體規格: 0.2ml
Phospho-Ack1(Tyr326) 磷酸化Ack1抗體 0.1ml
LIF 白血病抑制因子抗體規格: 0.1ml50L 超快核酸電泳液干粉
1個 4mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)
活/死細胞染色試劑盒(Calcein AM·PI) 1000 次 140632-1000
環氧基磁珠 2mL 130517-2
1mL SMD1163 酵母菌種
1mL DH5α 菌種
40 次 miRNA PAGE 膠回收試劑盒
1mL WB600 枯草宿主菌菌種
人培養細胞基因組 DNA 30μg 131035-30
超螺旋 DNA 分子量標準 100uL 130960-100
50 次 雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 488·PI)
10μL HRP 標記的抗生物素抗體
5g 葉酸
10mL 弗氏不*佐劑
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚葡萄糖苷 5mg CAS114162-64-0
色素細胞生長因子 - 不含 TPA 5mL 21-0090-5
一管式拭子 DNAout 20 次 60501-20
1000U RecJf 核酸外切酶
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