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雜交瘤細胞株;9H3圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 雜交瘤細胞株;9H3圖片
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
CK16 細胞角蛋白16抗體規格: 0.1ml
Azurocidin/Cationic antimicrobial protein 37 肝素結合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體規格: 0.2ml
Phospho-SMC1(Ser957) 磷酸化染色體結構維持蛋白質1抗體規格: 0.1ml
Cecropin 抗菌肽/天蠶素抗體規格: 0.2ml
DOCK1 細胞質分裂付出蛋白1抗體規格: 0.2ml
SFRP1 分泌型卷曲相關蛋白1抗體規格: 0.1ml
STK36 絲氨酸/蘇氨酸激酶36融合同源蛋白抗體規格: 0.2ml
XAGE2 瘤/睪抗原12家族2抗體規格: 0.2ml
Rho C RhoC抗體規格: 0.1ml
CHMP1A 染色質修飾蛋白1A抗體規格: 0.2ml
Septin 8 細胞分化蛋白SEPT8抗體規格: 0.2ml
Phospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383) 磷酸化瘤抑制基因PTEN抗體規格: 0.1ml
CCR9 細胞表面趨化因子受體9抗體規格: 0.1ml
JAKMIP2/NECC1 JAK和微管相互作用蛋白2抗體(JAK和微管相互作用蛋白2)規格: 0.2ml
PPIG 親環蛋白(親環素)PPIG抗體規格: 0.2ml
Caspase 4 半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體規格: 0.1mlABI 高通量 DNA 測序 1次 D009-1
T7 體外轉錄試劑盒 50 次 91106A-50
10g 維生素 B1
20 次 克必隆常態轉化液
10mL 弗氏*佐劑
5mL 肝細胞生長因子
100g DNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)
雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V- 熒光素 647·7-AAD) 20 次 140631-20
Southern Marker Oligo( 生物素 ) 20 次 120654E-20
10mL 石蠟油,PCR
25 次 動物細胞核蛋白微量制備試劑盒
1g 羥基脲
25mg 嗜熱菌蛋白酶
硫酸鎂七水 100g CAS10034-99-8
胃蛋白酶抑制劑溶液,1 mg/mL 1mL 100835-1
50 次 柱式凝固血液 DNAout
100g 馬來酸
1mL ATP 溶液,1mM
10mL DNA 上樣液 ( 紅 ),6×
1mL JM83 菌種
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