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小鼠雜交瘤細胞;HB KC-48圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱小鼠雜交瘤細胞;HB KC-48圖片
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C6
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
MOBKL2C Mob1同源蛋白MOBKL2C抗體 規格:0.2ml
CKLFH4/CMTM4 趨化素樣因子超家族成員4抗體 規格:0.2ml
Signal recognition particle 信號識別顆??贵w 規格:0.1ml
CSTP1 鈣調神經磷酸酶CSTP1抗體 規格:0.2ml
GIMAP8 GTP酶IMAP家族成員8抗體 規格:0.2ml
NIPA 間變性淋巴瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體 規格:0.2ml
phospho-ATF2 (Thr55) 磷酸化活化復制因子2抗體 規格:0.1ml
Nitrotyrosine 硝基酪氨酸抗體 規格:0.2ml
phospho-PRKCQ(Thr538) 磷酸化蛋白激酶C theta抗體 規格:0.1ml
FBXO28 FBXO28蛋白抗體 規格:0.2ml
VGLL1 轉錄輔助因子退變樣蛋白1抗體 規格:0.2ml
PJA2/RNF131 環指蛋白131抗體 規格:0.2ml
KF1/ZFP103 鋅指蛋白103抗體 規格:0.2ml
NFAT5 活化T細胞核因子5蛋白抗體 規格:0.2ml
VMAT2 腦單胺類神經遞質轉運蛋白抗體 規格:0.2ml4- 甲基傘形酮 CAS90-33-5 10g
小鼠抗 His 標簽單抗 130573-1000 1000μL
5g 脂肪酶
10g L- 阿拉伯糖
100g 丙烯酰胺
10×100μL NMY51 酵母感受態細胞
番紅 O CAS477-73-6 5g
鹽酸胍溶液,8M 131120-200 200mL
50 次 柱式細菌 RNA-DNA 雙提試劑盒
500g 磷酸氫二
10mg 牛甲狀素蛋白
1000U PvuII
玉米素 CAS13114-27-7 5mg
植物 Actin 小鼠單抗 130570-30 30μL
非凍型組織 RNA 保存液 3060-100 100mL
25g 咪唑
0.5mL dGTP 溶液,100mM
4次 大提柱式細菌 DNAout( 含溶菌酶 )
200U 尿嘧啶糖基化酶抑制劑
丁酸 CAS156-54-7 1g
DNA 快速連接試劑盒 70602-30 30 次
20 次 一站式 His 標記蛋白質微量純化套裝
10 次 克必隆 eTS 核心試劑盒
100g 可溶性淀粉
RIMKLA/FAM80A 核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體 規格:0.2ml
ANGEL2 ANGEL2蛋白抗體 規格:0.2ml
C3orf33 3號染色體開放閱讀框33抗體 規格:0.2ml
PAPP A2 娠相關漿蛋白A2抗體 規格:0.2ml
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