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小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)圖片

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌ATCC

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-01-13 09:46:00瀏覽次數:281次

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小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)圖片售后:收到細胞后7天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細胞名稱 小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)圖片
形態特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  L-M (TK-)細胞是L-M(ATCC CCL-1.2 )細胞系的衍生株,具有抗5-溴脫氧尿核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BUdR)、缺乏胸腺嘧啶核苷激酶(thymidine kinase mutant)的特性,廣泛用于遺傳學、生物化學基礎研究。也可用在體細胞雜交、基因轉移等實驗研究中。 
培養條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C36
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權限 A類
小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)圖片細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)圖片質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)圖片操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。

0.5mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個
D007-1Illumina 高通量 DNA 測序1次
130560-10Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態細胞0.1mL×10
小鼠抗 T7 標簽單抗100μL
甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷25g
三氟100mL
200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 袋裝 )1000 支
穿刺培養基10 管
23-0240-100Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL
60801-100柱式腐殖酸清除劑100 次
SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )20L
dNTP 和引物清除劑100 次
包涵體微量純化試劑盒20 次
植物葉綠體蛋白提取試劑盒50 次
CAS5486-84-0固藍 BB 鹽5g
90510-2包涵體大量純化試劑盒2次
長效期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L
兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)50 次
15mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個GSK1210151AI-BET151
(6S,9aS)-Hexahydro-6-[(4-hydroxypheICG-001
Sulfosuccinimidyl-2-(biotinamido)-ethyl-1,3’-dithiopropionate; Biotin disulfide N-Hydroxysulfosuccinimide esterSulfo-NHS-SS-Biotin
2-Pyrimidinamine, N-[4-(4-ami-piperidinyl)-2-methoxyphenyl]-5-chloro-4-(1H-indol-3-ylAZD-3463
4-(4-Chlorophenyl)piperazin-1-yl)(morpholino)methanoneAKR1C3 Inhibitor III
2-(Phosphonomethyl)pentane-1,5-dioiNAALDase Inhibitor, PMPA
7,8,13,13α-Tetradehydro-3-hydroxy-2,9,10-trimethoxyberbinium, Neprotin, YatrorizineJatrorrhizine
4,4-Difluoro-8-(4-ethynylphenyl)-1,3,5,7-tetramethyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceneBODIPY-Acetylene Reagent
N2-[(2S)-2-(3,5-Difluorophenyl)-2-hydroxyethanoyl]-N1-[(7S)-5-methyl-6-oxo-6,7-dihydro-5H-dibenzo[b,d]azepin-7-yl]-L-alaninamide; LSN-411575LY-411575
N-(6-(4-(2-((4-methylpiperazin-1yl)methyl)-3-(trifluoromethyl)phenyl)amino)-2-oxoethyl)phenoxy)pyrimidin-4-yl)cyclopropanecarboxamideWS6
DiscoveryPak HDAC Inhibitor Set IIDiscoveryPak HDAC Inhibitor Set II
小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)圖片10X Red Blood Cell Lysis Buffer10X Red Blood Cell Lysis Buffer
Histone H4 Peptide, tetra-acetylated, biotin conjugateHistone H4 Peptide, tetra-acetylated, biotin conjugate
1-Methyl-D-tryptophan; IndoximodIDO Pathway inhibitor
雷帕霉素Rapamycin
Pifithrin-uPifithrin-u

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