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tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 轉染pCAG-tTA質粒,經2.0ug/ml puromycin篩選,為Tet-off穩定調控細胞系,受強力霉素Dox調控倍數在20~50倍。細胞倍增時間為24小時。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 5%FBS + 2.0ug/ml puromycin
傳代方法 1:4傳代,2~3天傳代一次。
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 B類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
3α-Hydroxy-5β-cholan-24-oic acid, 3α-Hydroxy-5β-cholanic acid, 5β-Cholan-24-oic acid-3α-ol; LCALithocholic acid
2-Methoxy-5-[(1Z)-2-(3,4,5-trimetho-xyphenyl)ethenyl]phenol; CRC 87-09, NSC 817373Combretastatin A4
6-Chloro-9-[(4-methoxy-3,5-dimethylBIIB 021
10-(4’-(N-diethylamino)butyl)-2-chlorophenoxazine hydrochlorideAkt Inhibitor (10-NCP)
(6R,7R)-3-[2-(2,4-dinitrophenyl)ethenyl]-8-oxo-7-[(2-thiophen-2-ylacetyl)amino]-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acidNitrocefin
5-(Thien-3-yl)-3-aminothiophene-2-carboxamideSC-514
Ammoniated Ruthenium OxychlorideRuthenium Red
N-[(1-Methyl-4-piperidinyl)methyl]-3-[3-(trifluoromethoxy)phenyl]imidazo[1,2-b]pyridazin-6-amineSGI-1776
N-[4-[[[[Tetrahydro-4-(4-methoxyphenyl)-2H-pyran-4-yl]methyl]amino]carbonyl]phenyl]-2-furancarboxamideJW55
(S)-2-(4-chlorophenyl)-1-(4-((5R,7R)-7-hydroxy-5-methyl-6,7-dihydro-5H-cyclopenta[d]pyrimidin-4-yl)piperazin-1-yl)-3-(isopropylamino)propan-1-oneGDC-0068
7-AAD; NSC-239759;EZSolution 7-Aminoactinomycin D
DiaEasy Dialyzer (800 ul) Floating racksDiaEasy Dialyzer (800 ul) Floating racks
Protein G Coated 96-well PlatesProtein G Coated 96-well Plates
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HRCL-017DMS153人小細胞肺癌細胞1×1061ml/T751500 元
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ICL-039LHBS3小菊頭蝠成纖維樣細胞1×1061ml/T751500 元
MIMCL-015EL4.IL-2小鼠淋巴瘤細胞1×1061ml/T751500 元
RCL-024MV-1-Lu水貂肺上皮細胞1×1061ml/T751200 元
UCL-030LLC-PK1豬腎細胞1×1061ml/T751400 元
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點擊大鼠氣管和支氣管上皮細胞培養試劑盒大鼠氣管和支氣管上皮細胞培養試劑盒試劑盒試劑盒詢價 元
點擊大鼠腦靜脈血管內皮細胞培養試劑盒大鼠腦靜脈血管內皮細胞培養試劑盒試劑盒試劑盒詢價 元
WHB-50-1WHB 離心管50ml錐形離心管(PET袋裝),USP VI級,滅菌-HOT25個/包,800個/箱詢價 元
WHB-CCF25-1-LC培養瓶賴氨酸包被25cm2培養瓶50ml透氣蓋滅菌5個/包,50個/盒詢價 元
WHB-MCE-0.45-30WHB 一次性針頭式過濾器直徑30mm針頭式過濾器,MCE膜,0.45um膜孔徑,黃色,滅菌材質PP40個/盒,320個/箱詢價 元
HUM- iCell -f001子宮內膜上皮細胞1×1063892 元5×1067185 元
HUM- iCell -s005新生兒表皮角化細胞1×1063748 元5×1067159 元
HUM-TUM-0018髓母細胞瘤組織細胞1×1065265 元5×1069185 元
MIC- iCell -n014視網膜色素上皮細胞1×1062562 元5×1064875 元0Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Fatty Acid Low, pH – 7.0
Resveratrol 3-O-D-Glucuronide (2。5 mg)3-hydroxy-5-[(1E)-2-(4-hydroxyphenyl)ethenyl]phenyl-β-D-Glucopyranosiduronic acid; Resveratrol 3-O-D-Glucuronide
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