當前位置:上海谷研實業有限公司>>ATCC細胞>>腫瘤細胞>> 人結直腸腺癌細胞;HT-29價格
人結直腸腺癌細胞;HT-29價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人結直腸腺癌細胞;HT-29價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是1964年由Fogh J用移植培養方法和含15%FBS的F12培養液從原發性腫瘤分離的。近來,已建株的培養細胞用含血清的McCoy's 5a培養基培養。 該細胞系在裸鼠中成瘤,也能在類固醇處理的地鼠中成瘤。該細胞可合成IgA、CEA、TGFβ結合蛋白和黏液素;表達尿激酶受體,但沒有檢測到血漿酶原活性;不表達CD4,但細胞表面表達半乳糖神經酰胺(HIV的可能替代受體)。該細胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos陽性;p53基因過表達,并且在273位密碼子處發
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR Amelogenin:X;D8S1179:10, 16;D21S11:29,30;D7S820:10;CSF1PO:11, 12;D3S1358:15, 17;TH01:6, 9;D13S317:11, 12;D16S539:11, 12;D2S1338:19, 23;D19S433:14;vWA:17, 19;THOX:8, 9;D18S51:13;D5S818:11, 12;FGA:20, 22。
同工酶
染色體 68-72
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
120905-200人淋巴細胞分離液 1.077(FICOLL 配置 ) 200mL
80101-50一管式病毒 DNA-RNAout50 次
熱啟動 Taq DNA 聚合酶100U
磁珠法 mRNA 提取試劑盒25 次
一管式 DNA 膠回收試劑盒100 次
小鼠瘤細胞分離液 1.070200mL
18-0370-50活性氧 ( 羥自由基 ) 測試盒 ( 比色法 )50 T
100816-250堿性膠電泳液 ,10×250mL
山羊抗兔 IgG(Fc),堿性磷酸酶標記100μL
DNA EDTA 溶液 ,0.5M,PH8.01 100mL
非凍型細菌 RNA 保存液100mL
BL21(DE3)plysS 菌種1mL
130614-200Therminator DNA 聚合酶200U
90308-25親和硅烷 25mL
T4 DNA 連接酶1000U
蛋白磷酸酶抑制劑混合液 11mL
柱式昆蟲 RNAout50 次
小鼠抗 V5 標簽單抗100μL
120508-0.063腸激酶 ( 輕鏈 )0.063μg植物細胞分裂素(Cytokinin)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠鼠痘毒(MPV)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠皮質醇(Cortisol)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠β內酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人載脂蛋白B1(apo-B1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人乳腺易感蛋白2(BRCA-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,化工儀器網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。