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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>腫瘤細(xì)胞>> 人低分化鼻咽癌細(xì)胞株;CNE2-S22圖片
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-01-11 08:35:50瀏覽次數(shù):405次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)人低分化鼻咽癌細(xì)胞株;CNE2-S22圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人低分化鼻咽癌細(xì)胞株;CNE2-S22圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 10%FBS
傳代方法 無
傳代情況 1:3傳代,3-4天傳1次
凍存條件 C5
支原體檢測 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
STR 陰性
同工酶
染色體 未做
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
CAS147-94-4β-D- 阿糖胞苷50mg
12-236JM101 菌種1mL
亞精胺三鹽1g
黃嘌呤1g
氫化可5g
熒光素 (FITC) 標(biāo)記親和素5mg
CAS50-01-1鹽酸胍100g
120684-1噻孢溶液 ,100mg/mL1mL
乙二胺四 (EDTA)100g
酵母蛋白酶抑制劑1mL
鹽酸四環(huán)素5g
鏈激酶100μg
CAS1400-61-9制霉菌素100mg
130590-100小鼠抗 HPC4 標(biāo)簽蛋白單抗100μL
植物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次
L- 絲氨酸10g
肌醇100g
VDAC1 小鼠單抗100 μL
CAS7647-14-5氯化100g
120642-30一站式 Blue Native PAGE 電泳套裝30 次馬β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞雌激素(E)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
恒河猴主要組織相容性復(fù)合體(MHC/RhLA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠維生素B6(VB6)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠乳腺標(biāo)志物-CA153ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠琥珀酸脫氫酶(SDH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠P53抗體(P53-ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
GAM肉湯/厭氧菌液體培養(yǎng)基/厭氧菌肉湯/Anaerobic Broth用于專性厭氧菌培養(yǎng)250克組裝/原裝
豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
植物維生素E(VE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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