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人腎細胞腺癌細胞;769-P圖片質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人腎細胞腺癌細胞;769-P圖片操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 這株細胞來源于原發性透明細胞腺癌。細胞呈邊界不清楚的球形,高核質比,有微絨毛和橋粒。可以在軟瓊脂中生長。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(25+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
131076-10磷酸蛋白染色試劑盒10 次
葡萄球菌 RNAout50 次
一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)30 次
CAS3671-99-6葡萄糖 -6- 磷酸二500mg
101118-10水樣病毒沉淀劑10 次
P- 硝基苯基磷酸膽堿100mg
鏈霉蛋白酶 E250mg
中性紅5g
海量 PCR 片段純化試劑盒5次
101216-100DNA Sarkosyl( 十二烷基肌氨酸 )100g
鈣蛋白酶抑制劑Ⅱ溶液,10mg/mL10mL
植物 RNA 提取高鹽溶液100mL
CAS8002-48-0麥芽浸粉250g
CAS2051-95-83- 苯甲酰丙酸5gNA陰離子樹脂
D-Fructose-1,6-diphosphate trisodium salt octahydrateD-果糖-1,6-二磷酸三,八水81028-91-3
4,6-DINITRORESORCINOL4,6-二基間二酚616-74-0
Sodium hexachloroplatinate(IV) hexahydrate鉑酸19583-77-8
(S)-(-)-1-(4-Methoxyphenyl)ethylamine(S)-(-)-1-(4-氧基)乙胺41851-59-6
Methyl 4-chloro-3-nitrobenzoate4--3-基酸酯14719-83-6
Sodium p-toluenesulfonate對磺酸657-84-1
2-(4-Aminophenyl)ethanol4-氨基乙醇104-10-9
3,4-Epoxytetrahydrofuran3,4-環氧四氫呋喃285-69-8
5-Chloro-2-methylaniline5-鄰胺95-79-4
4-(METHYLTHIO)BENZONITRILE對硫基21382-98-9
2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone2-氨基-2',5-二二2958-36-3
Nepsilon-Fmoc-Nalpha-Cbz-L-LysineN'-芴氧羰基-N-芐氧羰基-L-賴氨酸86060-82-4
Methyl 4-iodobenzoate4-碘酸酯619-44-3
Malonyl chloride丙二酰1663-67-8
4-Ami-methyl-3-propyl-5-pyrazolecarboxamide4-氨基-1-基-3-正丙基-1H-吡唑-5-酰胺139756-02-8
Theophylline茶58-55-9
Didodecyldimethylammonium bromide雙十二烷基二基溴化銨3282-73-3
Bis(2-nitrophenyl) disulfide雙(2-基基)二硫1155-00-6
Zinc borate酸鋅1332-07-6
Sodium xylenesulfonate二磺酸1300-72-7
60908-2質粒 ( 載體 ) 系列產品2μg
Leptomycin B( 出核轉運抑制劑 )10μg
Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制劑 )1g
130637-500Tma 核酸內切酶 III500U
一站式平末端克隆試劑盒20 次
dNTP 溶液,2.5mM5mL
Caspase 4 檢測試劑盒 20 次
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