當前位置:上海谷研實業有限公司>>ATCC細胞>>腫瘤細胞>> Cas9穩定表達的人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3-Cas9-562價格
Cas9穩定表達的人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3-Cas9-562價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
Cas9穩定表達的人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3-Cas9-562價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使SK-OV-3細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:2~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:11,11;D12S391:22,22;D13S317:8,11;D16S539:12,12;D18S51:16,17,18;D19S433:14,14.2;D21S11:30,31,31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:14,14;D5S818:11,11;D6S1043:12,12;D7S820:13,14;D8S1179:14,15;FGA:24,26;Penta E:5,13;TH01:9,9.3;TPOX:8,11;vWA:17,19;
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
鎳柱介質2mL
90306B-100胰酶消化液 ( 無 EDTA)100mL
130845-50柱式分枝桿菌 RNAout50 次
腦心浸液500g
8- 氧代鳥嘌呤 DNA 糖基化酶80U
DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次
地高標記 dUTP 溶液25μL
22-0200-5Di-8-ANEPPS5mg
120656-1剪切式勻漿機1臺
葡聚糖 T-200010g
半乳糖氧化酶150U
Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制劑 )1g
蝦堿性磷酸酶300U
23-0770-2TLR4 激活劑2mL
80927A-4大提柱式細菌 DNAout4次
RNase-free 水1mL
超微量 ATP 酶測試盒 ( 測 Ca2+ATPase)25 T黑化大家鼠肺成纖維樣細胞英文名稱:NRL1
RL1(大鼠肺成纖維樣細胞)5×106cells/瓶×2
HCC94(人子宮鱗細胞(高分化))5×106cells/瓶×2
BL瓊脂培養基/BL Medium雙岐桿菌分離培養250克國產/進口
馬丁肉湯1萬毫升/袋國產/進口
HLF-a(人肺細胞)5×106cells/瓶×2
長尾綠猴胚胎細胞英文名稱:4179
人腺細胞英文名稱:HCC1937
泛酸測定培養基/Pantothenic Acid Assay Medium嬰兒食品和粉中泛酸測定250克國產/進口
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)英文名稱:PC-12(低分化)
厭氧菌瓊脂/GAM瓊脂/Anaerobic Agar用于梭菌和其他厭氧菌的分離培養250克國產/進口
P19(小鼠畸胎瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion
NR8383(大鼠肺泡巨噬細胞)5×106cells/瓶×2
FRhK-4(恒河猴胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肝細胞英文名稱:H22
DG-18瓊脂/Dichloranglycerol Agar食品中霉菌和酵母菌分離培養250克國產/進口
CaEs-17, 人食管細胞株
HCCLM3(人高轉移肝細胞)5×106cells/瓶×2
BGS瓊脂/BGS Agar沙門氏菌分離培養250克國產/進口
卵磷脂(蛋黃)/蛋黃軟磷脂/磷脂酰膽堿/蛋黃卵磷脂/磷脂蛋黃素/Lecithin from egg yolkBR10克國產/進口
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
正常人結腸組織細胞英文名稱:CCD-18Co
人腺細胞英文名稱:MDA-MB-231
通用洗柱液250mL
凝血酶1000U
18-0140-25超微量 ATP 酶測試盒 (Na+K+、Ca2+Mg2+ATPase)25 T
101211-100DNA EDTA 2Na100g
Stbl3 感受態細胞0.1 mL×10
DNA 電泳分子量標準 (200-5000 bp)50 次
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,化工儀器網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。