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Cas9穩定表達的人乳腺癌細胞;MCF7-Cas9-544*

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌ATCC

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-01-07 10:26:52瀏覽次數:370次

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Cas9穩定表達的人乳腺癌細胞;MCF7-Cas9-544*采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。

Cas9穩定表達的人乳腺癌細胞;MCF7-Cas9-544*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

Cas9穩定表達的人乳腺癌細胞;MCF7-Cas9-544*現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫學診斷。使用前仔細閱讀本說明書

產品名稱
用途僅用科研
保存條件4℃保存一年;-20℃長期保存

細胞名稱
形態特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是采用慢病毒感染的方式使MCF7細胞穩定表達Cas9-Flag-Puromycin,經2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。 
培養條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS;2ug/ml Puromycin
傳代方法  1:3~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR  Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,10;D12S391:18,20;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:14,14;D19S433:13,14;D21S11:30,30;D2S1338:21,23;D3S1358:16,16;D5S818:11,12;D6S1043:12,18;D7S820:8,9;D8S1179:10,14;FGA:23,25;Penta E:7,12;TH01:6,6;TPOX:9,12;vWA:14,15
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
注意:*次植入后,在6-16小時內更換培養基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數據,用于證明細胞的真實性,并且幫助客戶更多的了解細胞特性。

12-253Stb13 菌種1mL
一步法大提質粒 DNAout5次
肌球蛋白100mg
甲基橙5g
考馬斯亮藍 G-25010g
CAS68-94-0次黃嘌呤1g
80807A-50動物細胞裂解液 A50mL
熒光染色細胞凋亡檢測試劑盒200 次
聚乙烯醇100g
D- 甘露醇250g
TMB 法生物素雜交試劑盒5次
CAS91079-38-8牛肉蛋白胨500g
131122-10考馬斯亮藍 R-25010g
豬膽鹽25g
Lillie 甲醛中性固定液250 mL3-Chloro-2-methylaniline3--2-基胺87-60-5
Phthaloyl amlodipine鄰二酰基氨地平88150-62-3
2-Ami,3,5-triazine2-氨基-1,3,5-三嗪4122/4/7
Z-ASP(OTBU)-OSUN-芐氧羰基-L-天冬氨酸 4-叔丁酯 1-(N-琥珀酰亞胺)酯3338-32-7
N,N,N',N'-Tetramethylchloroformamidinium hexafluorophosphateN,N,N',N'-四基脒六磷酸94790-35-9
TRIMETHYL(PENTAFLUOROPHENYL)SILANE三基五基硅烷1206-46-8
Acorus gramineus, ext.石菖蒲油91745-11-8
6,7,8-TRIMETHOXYCOUMARIN白蠟樹素6035-49-0
Dihexadecyldimethylammonium bromide雙十六烷基二基溴化銨70755-47-4
TITANIUM OXYSULFATE硫酸氧鈦123334-00-9
FMOC-D-ALA-WANG RESINFMOC-D-ALA-WANG RESIN
N-(tert-Butyldimethylsilyl)-N-methyl-trifluoroacetamideN-(特丁基二基硅)-N-基三乙酰胺77377-52-7
ASTRAGALIN紫云英甙480-10-4
Methyl 1,2,4-triazole-3-carboxylate1,2,4-三氮唑-3-羧酸酯4928-88-5
12-Crown-412-冠-4294-93-9
Zinc nitrate hexahydrate六水酸鋅10196-18-6
2-Sulfobenzoic anhydride2-磺基酸酐1981/8/3
Methyl trifluoromethanesulfonate三烷磺酸酯333-27-7
TRIMYRISTIN甘油三肉豆蔻酸酯555-45-3
1,2-Bis(triethoxysilyl)ethane1,2-二(三乙氧基硅基)乙烷16068-37-4
1-TETRADECANESULFONIC ACID SODIUM SALT十四烷基硫酸6994-45-2
Bispyribac-sodium雙草125401-92-5
Platinum dioxide無水氧化鉑1314-15-4
Cuprous bromide溴化亞銅7787-70-4
L- 乳酸脫氫酶 ( 兔肌 )2.5ku
活/死細胞染色試劑盒(Calcein AM·PI)1000 次
CAS7365-44-8N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -2- 氨基乙烷磺酸5g
130877-1可逆性銅染試劑盒1套
α-Tubulin 小鼠單抗1000μL

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