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人急性T淋巴細胞白血病細胞;JurkatE6-1圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人急性T淋巴細胞白血病細胞;JurkatE6-1圖片
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞是Jurkat-FHCRC細胞的克隆,是Jurkat細胞的衍生物。佛波酯或外源凝集素或T3單抗刺激后該細胞可產生大量的IL-2。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS
傳代方法 保持細胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,不超過3×106 cells/ml。
傳代情況 C15
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:8,12;D16S539:11;D18S51:13,21;D19S433:14,15.2;D21S11:31.2,33.2;D2S1338:19,23;D3S1358:15;D5S818:9;D7S820:8,12;D8S1179:13,14;FGA:20,21;TH01:6,9.3;TPOX:8,10;vWA:18;
同工酶
染色體 46,XY
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
咪唑25g
dGTP 溶液,100mM0.5mL
大提柱式細菌 DNAout( 含溶菌酶 )4次
尿嘧啶糖基化酶抑制劑200U
CAS156-54-7丁酸1g
70602-30DNA 快速連接試劑盒30 次
一站式 His 標記蛋白質微量純化套裝20 次
克必隆 eTS 核心試劑盒10 次
可溶性淀粉100g
成骨細胞生長因子5mL
DNA DTT( 二硫代蘇糖醇 )10g
140625-50雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-APC·7-AAD) 50 次
90602I-50DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hinc Ⅱ50 次
十六烷基*基溴化銨25g
動物 DNAout250mL
對氨基苯磺酸25g
DNA Triton100mL
CAS657-27-2L- 賴氨酸鹽酸鹽25g
100837-10EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白10mL
柱式昆蟲 mtDNAout,測序10 次
Monobromobimane [mBBR]25mgNADE23 纖維素
1,3-Dioxan-5-ol甘油縮86687-05-0
Fmoc-N-methyl-L-aspartic acid 4-tert-butyl esterFmoc-N-基-L-天冬氨酸 4-叔丁酯152548-66-8
1-Adamantanemetha-金剛烷醇770-71-8
N-AcetylcaprolactamN-乙酰己內酰胺1888-91-1
5-BROMO-2-METHYLBENZENESULFONYL CHLORIDE5-溴-2-基磺酰69321-56-8
4-Iodopyridine4-碘吡啶15854-87-2
3-Methyl-2-benzothiazolinone hydrazone hydrochloride monohydrate酚試劑38894-11-0
S-ADENOSYL-L-METHIONINES-腺苷蛋氨酸17176-17-9
PanthenolDL-泛醇16485-10-2
2-Methylthiophenothiazine2-巰基吩噻嗪7643/8/5
Fluorescent Brightener 184熒光增白劑 1847128-64-5
ETHYL VIOLET乙基紫2390-59-2
4-METHYLUMBELLIFERYL PHOSPHATE4-基傘形磷酸酯3368/4/5
ALLYLTRIETHOXYSILANE丙基三乙氧基硅烷2550/4/1
Artemisia argyi oil艾葉油
Herbacetin草質素527-95-7
2-(4-((3-Chloro-5-(trifluoromethyl)-2-pyridinyl)oxy)phenoxy)-propanoic acid methyl ester高效吡禾靈72619-32-0
Isopropyl ether異丙108-20-3
Silicon carbide碳化硅409-21-2
3-Hydroxy-2-nitropyridine3-羥基-2-基吡啶15128-82-2
Praeruptorin B白花前胡乙素81740-07-0
Methyl 2-bromopropionate2-溴丙酸酯5445-17-0
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