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人胚肺二倍體細胞;KMB-17說明書現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產品名稱 | 人胚肺二倍體細胞;KMB-17說明書 |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來自于一個4周齡女性胚胎的正常肺組織,于1975年在中國醫學科學院昆明醫學生物學研究所建立;可作為轉染宿主,用于肺損傷或分化的研究。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 PN6
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
注意:*次植入后,在6-16小時內更換培養基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數據,用于證明細胞的真實性,并且幫助客戶更多的了解細胞特性。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。PCR 法 DNA 探針生物素標記試劑盒 5次
PCR 污染清除劑 500mL
PCR 抑制物清除劑 1mL
PCR 優化試劑盒 1套
PCR LIC 克隆套裝 1μg
PD 98059(MAPKK 抑制劑 ) 2mg
PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 ) 1g
Percoll 100mL
PFG 固定液 250 mL
Pfu DNA 聚合酶 100U
Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活劑 ) 1mg
Phusion DNA 聚合酶 250U
Pifithrin-a(p53 抑制劑 ) 5mg
PLP 固定液 250 mL
PLPD 固定液 250 mL
PMA/TPA (PKC 激活劑 ) 1mg
PMSF 溶液,10mg/mL 5mL
pNPP 干粉 1g
Poly r(A) 100mgADB-PINACA N-(4-hydroxypentyl) metabolite (5 mg)N-(1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)-1-(4-hydroxypentyl)-1H-indazole-3-carboxamide; ADB-PINACA N-(4-hydroxypentyl) metabolite
1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-PE (250 mg)1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphatidylethanolamine; 1,2-DSPE|1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-Phosphoethanolamine; 1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-PE
Zanamivir (5 mg)5-(acetylamino)-4-[(aminoiminomethyl)amino]-2,6-anhydro-3,4,5-trideoxy-D-glycero-D-galacto-non-2-enonic acid; GG 167|GR 121167X|Relenza; Zanamivir
ML-180 (5 mg)6-[4-(3-chlorophenyl)-1-piperazinyl]-3-cyclohexyl-2,4(1H,3H)-pyrimidinedione; CID-3238389; ML-180
Ketoconazole (5 g)1-[4-[4-[[(2R,4S)-2-(2,4-dichlorophenyl)-2-(1H-imidazol-1-ylmethyl)-1,3-dioxolan-4-yl]methoxy]phenyl]-1-piperazinyl]-ethanone; Nizoral|R 4140Ketoconazole
Prostaglandin B2-d4 (1 mg)9-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z,8(12),13E-trien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; PGB2-d4; Prostaglandin B2-d4
NADH Standard (1。5 mg)NADH Standard
CP 47,497-C6-homolog (5 mg)cis-5-(1,1-dimethylhexyl)-2-(3-hydroxycyclohexyl)-phenol; CP 47,497-C6-homolog
α-Linolenoyl Ethanolamide-d4 (100 ug)N-(2-hydroxyethyl-1,1’,2,2’-d4)-octadeca-9Z,12Z,15Z-trienamide; α-Linolenoyl Ethanolamide-d4
Streptavidin:SureLight P3 (1 ea)Streptavidin:SureLight P3
cis-4,10,13,16-Docosatetraenoic Acid (5 mg)4Z,10Z,13Z,16Z-docosatetraenoic acid
I-BET151 (50 mg)GSK 1210151A; 7,3,5-dimethyl-4-isoxazolyl-1,3-dihydro-8-methoxy-1-[1R-1-(2-pyridinyl)ethyl]-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-one
Poly(A) 聚合酶 20U
Poly(I).Poly(C) 250mg
Poly(U) 聚合酶 60U
PreScissiom 蛋白酶 100U
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