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人視網膜上皮細胞;APRE-19*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人視網膜上皮細胞;APRE-19*現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系源自于一名19歲車禍罹難的健康男性的視網膜組織,由Amy Aotaki-Keen建系于1986年。該細胞系表達視網膜色素細胞*的分子標記如胞內視黃醛結合蛋白和PRE-65。
培養條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C6
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
注意:*次植入后,在6-16小時內更換培養基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數據,用于證明細胞的真實性,并且幫助客戶更多的了解細胞特性。
堿性磷酸酶標記親和素 100mg
堿性磷酸酶測試劑盒 48 T
堿性磷酸酶測試劑盒 48 T
堿性品紅 5g
健那綠 B 1g
交聯瓊脂糖凝膠 2B 100mL
交聯瓊脂糖凝膠 4B 100mL
交聯瓊脂糖凝膠 6B 100mL
膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒 100 次
膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒 50 次
膠原蛋白Ⅰ型 1g
膠原酶Ⅰ型 100mg
膠原酶Ⅱ型 100mg
膠原酶Ⅲ型 100mg
膠原酶Ⅳ型 100mg
焦碳酸二乙酯 10mL
角膜上皮細胞生長因子 5mL
角質細胞生長因子 5mL
角質細胞生長因子 - 不含 BPE 5mL
角質細胞生長因子 - 不含動物成分 5mLPP2 (1 mg)3-(4-chlorophenyl)-1-(1,1-dimethylethyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine; AGL 1879; PP2
Sphingosine-1-Phosphate Lyase Fluorogenic Substrate (10 mg)2S-ammonio-3R-hydroxy-5-((2-oxo-2H-chromen-7-yl)oxy)pentyl hydrogen phosphate; S1P Lyase Fluorogenic Substrate; Sphingosine-1-Phosphate Lyase Fluorogenic Substrate
CB-86 (1 mg)N-cyclopropyl-8-[3-(1,1-dimethylheptyl)-5-hydroxyphenoxy]-oct*; CB-86
Iso-Olomoucine (10 mg)2-[[7-methyl-6-[(phenylmethyl)amino]-7H-purin-2-yl]amino]-ethanol; Iso-Olomoucine
tetranor-PGJM (100 ug)8-((1R,2S)-2-(2-carboxyethyl)-5-oxocyclopent-3-en-1-yl)-6-oxooctanoic acid; tetranor-PGJ Metabolite; tetranor-PGJM
(+)-Warfarin (25 mg)4-hydroxy-3-[(1R)-3-oxo-1-phenylbutyl]-2H-1-benzopyran-2-one; (R)-Warfarin; (+)-Warfarin
(S)-Lisofylline (10 mg)3,7-dihydro-1-[5S-hydroxyhexyl]-3,7-dimethyl-1H-purine-2,6-dione; (+)-Lisofylline|(S)-LSF; (S)-Lisofylline
IWR-1-endo (25 mg)4-[(3aR,4S,7R,7aS)-1,3,3a,4,7,7a-hexahydro-1,3-dioxo-4,7-methano-2H-isoindol-2-yl]-N-8-quinolinyl-benzamide; IWR-1-endo
16,16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1 (10 mg)6,9-dioxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16,16-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid; 16,16-dimethyl-6-keto PGE1; 16,16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1
JWH 071 (5 mg)(1-ethyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-methanone; JWH 071
Kahweol (5 mg)3bS,4,5,6,7R,8R,9,10,10aR,10bS-decahydro-7-hydroxy-10b-methyl-5aS,8-methano-5aH-cyclohepta[5,6]naphtho[2,1-b]furan-7-methanol; Kahweol
Sulprostone (500 ug)N-(methylsulfonyl)-9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16-phenoxy-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-amide; Sulprostone
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